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上海滬鼎為您總結(jié)ELISA實驗中的常見問題

日期:2017-06-13瀏覽:2195次

    轉(zhuǎn)眼間,2017年已過半,上海滬鼎在這半年里也一直在總結(jié)在進(jìn)步,這源于客戶的支持和員工的努力,感謝各位讓我們在成長中進(jìn)步,在進(jìn)步中發(fā)展,取得不錯的成績。在上半年,客戶對ELISA試劑盒的咨詢也很多,我司技術(shù)部都一一解答,助力客戶的實驗。我司技術(shù)部將上半年ELISA試劑盒常見問題問答整理分析出來以方便各位了解,下面,就跟隨小編一起來看看吧:
(1)問:小鼠乙酰膽堿酶聯(lián)免疫試劑盒后期數(shù)據(jù)處理中空白的OD值有什么作用?
     答:可以將標(biāo)準(zhǔn)品和樣本的OD值同時減去空白的值進(jìn)行計算,或者都不減,保持同一水平就行。 
(2)問:那我們算出來的ACH含量為什么出現(xiàn)負(fù)值?
     答:說明個別樣本的濃度很低,當(dāng)濃度接近第6個點的時候,直線方程就有可能計算出負(fù)值。
(3)問:我兩個空白孔一個啥都不加,一個加了后面的A液,B液還有終止液, 請問用哪一個?
     答:用加了A液,B液還有終止液的那個更加準(zhǔn)確,因為樣本都加過這些,可以排除相應(yīng)的干擾。
(4)問:我想問一下,標(biāo)準(zhǔn)品濃度與標(biāo)準(zhǔn)品吸光度值之間是不是線性回歸?檢測出來的吸光度值很低一般都存在哪些原因?大部分在0.08左右 ?(大鼠5羥色胺(5-HT)酶聯(lián)免疫試劑盒)
     答:是線性回歸。檢測出來的值比較低 ,樣本、稀釋、操作等,原因很多,但只要在可操作范圍就行 。 
(5)問:做出來的結(jié)果:標(biāo)準(zhǔn)品的吸光度呈線性回歸,但是樣品的吸光度都和本體吸光度值接近,正常未予干預(yù)的大鼠血漿都基本沒有5-HT 表達(dá),這是什么原因?(大鼠5羥色胺(5-HT)酶聯(lián)免疫試劑盒)
     答:樣本、稀釋、室控和機(jī)器操作等,原因都可能造成吸光度都和本體吸光度值接近,好像熒光法里面有種試劑盒可以檢測滴度。
(6)問:酶聯(lián)免疫試劑盒的使用的方法是什么啊?
     答:采用雙抗夾心法 (目前暫行)
(7)問:一個孔需要多少量的血清?
     答:一個孔上樣量10-50微升。
(8)問:未處理的樣本我需要郵寄多少的量?
     答:每個孔需要100ul
(9)問:樣本怎么保存?
     答:當(dāng)天要用的樣本保存4℃,隔天樣本-20℃(近期一個月左右要用的樣本),長期保存樣本-70℃(一年或者更長時間多久都可以用),避免反復(fù)凍融。
(10)問:EP管是什么管?
      答:離心管。
(11)問:收集血清的時候用什么管?
      答:普通離心管即可。
(12)問:96t可以檢測多少個樣本?48t可以檢測多少個樣本?
      答:96t標(biāo)準(zhǔn)的可以檢測85個樣本,其他有10個標(biāo)準(zhǔn)品孔,1個空白對照。96t單孔可以檢測90個樣,7個標(biāo)準(zhǔn)品控 1個空白對照。48t標(biāo)準(zhǔn)的可以檢測37個樣本,其他有10個標(biāo)準(zhǔn)品孔,1個空白對照。48t單孔可以檢測40個樣本,其他有7個標(biāo)準(zhǔn)品孔,1個空白對照。
(13)問:標(biāo)準(zhǔn)的檢測85個樣本的和單孔相比, 有什么好的地方嗎?
      答:標(biāo)準(zhǔn)的檢測又叫復(fù)孔檢測,標(biāo)準(zhǔn)的檢驗重復(fù)性測的結(jié)果好,所以大家都叫復(fù)孔是標(biāo)準(zhǔn)的檢測。
(14)問: 酶標(biāo)板分次使用 剩下的建議怎么保持 ?
      答:要是真的用不完或標(biāo)本不多的情況下。做點處理后:板條和板架都是可拆卸的,可以再用之,前拆下4條放置錫箔袋或其他無污染的袋子,放到冰箱 2-8度保存。
(15)問:酶標(biāo)包被版是酶標(biāo)板嗎?
      答:是的。
(16)問:請問植物茉莉酸和水楊酸檢測的試劑盒,我們提取擬南芥的,一般取樣量是多少?
      答:1-3g。
(17)問:大鼠骨特異性堿性磷酸酶B(ALP-B)ELISA,大鼠血清抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5B),我發(fā)現(xiàn)試劑盒里缺少標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液,沒有它我的實驗無法進(jìn)行,盒子里面有特殊稀釋液是用來稀釋樣品的,但都沒有標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液,我的樣品已超出zui低檢測限,所以需要稀釋標(biāo)準(zhǔn)品才行嗎?
      答:特殊稀釋液是用來稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的,特殊稀釋液一般情況不用當(dāng)樣本濃度特別高是先用特殊稀釋液稀釋,標(biāo)準(zhǔn)品需要再稀釋就也要用特殊稀釋液。
(18)問:測出來的標(biāo)準(zhǔn)曲線值前面幾盒都是0.98 才正常,后面怎么變成0.93了?
      答:某個點偏離大可以去掉,保留5個點
(19)問:是不是空白對照就是什么都不加?
      答:不加樣本,不加樣本稀釋液,不加酶標(biāo)試劑 其他都可以加。
(20)問:樣本稀釋液是配好的嗎?
      答:樣本稀釋液是配好的
(21)問:樣本稀釋液可以用來直接稀釋血清嗎?
      答:可以,直接加40ul就可以。
(22)問:檢測的時候需要在操凈臺中操作嗎,還是在外面操作就可以了?
      答:要求不是很嚴(yán)格,根據(jù)自己實驗室的設(shè)備而定,都可以。
(23)問:人和肽素(copeptin)酶聯(lián)免疫試劑盒,洗滌液是濃縮的,是一次配好,還是現(xiàn)配現(xiàn)用?
      答:濃縮的,現(xiàn)配現(xiàn)用。
(24)問:酶聯(lián)免疫試劑盒方法的不測人血小板第四因子里IgG抗體的滴度嗎?
      答:Elisa不測滴度的,熒光法可以測。
(25)問:酶標(biāo)板不平,影響結(jié)果嗎?
      答:不影響結(jié)果的。
(26)問:小鼠TNF-α ELISA 我的標(biāo)本是細(xì)胞,我想要測的結(jié)果:抑制TNF的產(chǎn)生  空白組、模型組、藥物組,藥物組要成梯度抑制TNF的產(chǎn)生、請問Elisa方法的可以測嗎?
      答:細(xì)胞可以測 但要分組,得到相應(yīng)的梯度值,計算結(jié)果。自己需要多查閱文獻(xiàn) 。
(27)問:人睪酮(T)酶聯(lián)免疫試劑盒,人雌三醇(E3)酶聯(lián)免疫試劑盒,是用什么酶標(biāo)記的?
      答:辣根酶標(biāo)記的  標(biāo)本里不能加*
(28)問:我測植物水楊酸,標(biāo)本是煙草葉片怎么處理的?那上清液檢測SA時,還需要用甲醇抽提嗎?
      答:稱取煙葉500mg,研磨成粉末狀,加入5ml濃度為0.01mol,PH值為7.4的PBS溶液,充分勻漿,離心取上清液(3000-4000轉(zhuǎn),15分鐘左右),分裝保存,一般需要長期保存需放在-80度,或者液氮中,備用,不用加甲醇。
(29)問:沒有做出標(biāo)準(zhǔn)曲線來,你知道什么原因嗎?
      答:操作肯定有問題,做之前把標(biāo)準(zhǔn)品搖勻下。
(30)問:買同一個指標(biāo)的幾個盒子,用不用都做標(biāo)準(zhǔn)曲線?
      答:如果同一個指標(biāo)買了3盒,建議每盒都做個標(biāo)曲。同一個盒子 ,即使分幾次用,做一個標(biāo)曲也行了,因為數(shù)值不會偏差太大,差不多。

 

    以上的問題中有你想要咨詢的問題嗎?如果您還有以上沒能提到的問題或是不是能解決的問題咨詢我司,我司技術(shù)員會竭誠為您服務(wù)!

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