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日期:2018-06-08瀏覽:728次
六月的清晨,清涼的空氣彌漫在世間每一個角落,陽光透過樹枝,陣陣微風(fēng)吹過,閉上眼,卻有一種說不出的恬靜,接下來上海滬鼎與您分享細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的基本原理。
細(xì)胞培養(yǎng)是用酶消化法將組織碎塊分離成單個細(xì)胞,用培養(yǎng)基制成細(xì)胞懸液,在體外適宜條件下,使細(xì)胞生長繁殖,并保留其一定的結(jié)構(gòu)和功能特性。細(xì)胞培養(yǎng)與組織培養(yǎng)、器官培養(yǎng)主要不同點在于原始培養(yǎng)的對象不同。細(xì)胞培養(yǎng)使用的是單個細(xì)胞懸液,組織培養(yǎng)使用的是組織塊(0.5~1立方毫米)或薄片(厚0.2毫米),而器官培養(yǎng)使用的是器官原基或器官的一部分或整個器官。
在組織培養(yǎng)中,細(xì)胞自組織塊周圍移出并生長,細(xì)胞在生長過程中總有移動(運(yùn)動)或其它變動,這樣就使被培養(yǎng)的組織難以長期維持其原有的結(jié)構(gòu)和功能。培養(yǎng)時間越長,發(fā)生變化的可能性越大,結(jié)果常使單一類型的細(xì)胞保存下來,zui終成了細(xì)胞培養(yǎng)。在細(xì)胞培養(yǎng)中,細(xì)胞生命活動和體內(nèi)細(xì)胞一樣,仍然是相互依存的,呈現(xiàn)一定的組織特異性,所以組織培養(yǎng)和細(xì)胞培養(yǎng)實際上無嚴(yán)格區(qū)別。
細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是生命科學(xué)中常用的研究手段,該方法能排除神經(jīng)體液因素的影響及肝、腎解毒功能的干擾,觀察某些因素或藥物對培養(yǎng)細(xì)胞的直接作用。通過實驗可獲得某一類型細(xì)胞的純培養(yǎng)。如心肌組織中心肌細(xì)胞約占50%,非心肌細(xì)胞占50%;而經(jīng)純化分離的心肌細(xì)胞懸液中,心肌細(xì)胞可達(dá)95%以上,這樣,心肌細(xì)胞原代培養(yǎng)實驗基本不受其它細(xì)胞的干擾。
在細(xì)胞培養(yǎng)實驗中能直接觀察到培養(yǎng)細(xì)胞生命活動的動態(tài)過程;用定時顯微攝影記錄可發(fā)現(xiàn)一些肉眼觀察不到的生命現(xiàn)象;還可利用電鏡手段、同位素標(biāo)記、放免法和免疫組化法等來研究細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)及細(xì)胞內(nèi)化學(xué)物質(zhì)的分布。此外,還能節(jié)約研究費(fèi)用。如在某些研究中,用100只動物做實驗所獲得結(jié)論與用100張蓋玻片或幾十個培養(yǎng)瓶而獲得結(jié)論具有相同的統(tǒng)計學(xué)意義,而細(xì)胞培養(yǎng)較之大批量的動物飼養(yǎng)花費(fèi)要小。
細(xì)胞培養(yǎng)方法也存在不足之處:培養(yǎng)細(xì)胞失去體內(nèi)細(xì)胞的制約和整體的調(diào)節(jié)作用,細(xì)胞形態(tài)和功能會發(fā)生一定程度的改變。培養(yǎng)方法、實驗試劑對細(xì)胞形態(tài)和功能有一定的影響,如胰蛋白酶可破壞細(xì)胞表面受體、酶、抗原等。長期體外培養(yǎng)的細(xì)胞,由于反復(fù)傳代、凍存和操作等因素的影響,可能發(fā)生染色體非整倍體改變,呈永生化或癌變的特征。
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