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日期:2018-06-29瀏覽:970次
早上好!感謝您與滬鼎走過每一個日子,愿有滬鼎的日子您ELISA實(shí)驗(yàn)每天都精彩,每步都健康快樂,每分都如意,每秒都幸福!瞧,誠信是滬鼎ELISA試劑盒供應(yīng)商的根本!
在70年代末期也有人采取否定的態(tài)度,對ELISA試劑盒全面肯定或全盤否定,這些都是不正確的,對一種新方法的建立和深入研究,要采取一分為二的方法加于評價,既要看到方法的優(yōu)點(diǎn),也要重視存在的問題,便于進(jìn)一步研究加以克服。
ELISA屬固相免疫測定,抗原、抗體的結(jié)合只在固相表面上發(fā)生。以抗體包被的夾心法為例,加入板孔中的標(biāo)本,其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結(jié)合的機(jī)會,只有zui貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。這是一個逐步平衡的過程,因此需經(jīng)擴(kuò)散才能達(dá)到反應(yīng)的終點(diǎn)。在其后加入的酶標(biāo)記抗體與固相抗原的結(jié)合也同樣如此。這就是為什么ELISA反應(yīng)總是需要一定時間的溫育。
溫育常采用的溫度有43℃、37℃、室溫和4℃(冰箱溫度)等。37℃是實(shí)驗(yàn)室中常用的保溫溫度,也是大多數(shù)抗原抗體結(jié)合的合適溫度。在建立ELISA方法作反應(yīng)動力學(xué)研究時,實(shí)驗(yàn)表明,兩次抗原抗體反應(yīng)一般在37℃經(jīng)1~2小時,產(chǎn)物的可達(dá)。為加速反應(yīng),可提高反應(yīng)的溫度,有些試驗(yàn)在43℃進(jìn)行,但不宜采用更高的溫度??乖贵w反應(yīng)4℃更為*,在放射免疫測定中多使反應(yīng)在冰箱中過夜,以形成zui多的沉淀。但因所需時間太長,在ELISA中一般不予采用。
誠信是滬鼎ELISA試劑盒供應(yīng)商的根本:
1.專業(yè)生產(chǎn)廠家并誠信代理多個國外品牌。
2.擁有*抗體更、更靈敏、更特異。
3.包被操作更規(guī)范吸附均勻,吸附性好,空白值低,孔底透明度高,遠(yuǎn)超行業(yè)。
4.有先進(jìn)的優(yōu)化方案,重復(fù)性、可靠性驚呆所有小伙伴。
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另外現(xiàn)在訂購本公司食品檢測試劑盒均可享受6.5折優(yōu)惠,另外還可免費(fèi)享受代測服務(wù)(上海地區(qū)還可上門取樣)及技術(shù)指導(dǎo)服務(wù)。
做到以下事項(xiàng)下一個ELISA大神就是您:
1)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)洗滌時各孔均需加滿液體,防止孔口有游離酶不能洗凈。
2)用于檢測的樣品應(yīng)保持新鮮。
3)用戶在初次使用試劑盒時,應(yīng)將各種試劑管離心數(shù)分鐘,以便試劑集中到管底。
4)每次實(shí)驗(yàn)留一孔作為空白調(diào)零孔,該孔不加任何試劑,只是zui后加底物溶液及2N H2SO4。測量時先用此孔調(diào)OD值至零。
5)要確保微量加樣器的準(zhǔn)確性,可以使用蒸餾水和電子天平進(jìn)行確定(由于蒸餾水不含雜質(zhì),溫度環(huán)境為20%左右時,lmL的水可以看作是lg、200 L的水可以看作是0.2g)每一把微量加樣器都應(yīng)該將其zui高量程和zui低量程進(jìn)行確定。
6)在使用微量加樣器時,吸取不同瓶子中液體后要更換槍頭,即使吸取標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
7)吸取液體時速度不易太快,以免產(chǎn)生氣泡,吸取的量不夠準(zhǔn)確。
8).將液體加到酶標(biāo)孔中時,避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孑L壁接觸,液滴會自然流下去。吸入液體時的的方法是吸兩檔打一檔,防止由于槍頭的毛細(xì)作用使得部分液體不能流出而造成的誤差。
9)吸取液體時要選用量程和需要量接近的微量加樣器吸,減少誤差。
10)實(shí)驗(yàn)前30min將試劑盒中的所有試劑從冰箱取出,使試劑盒中的所有試劑與提取好的樣品溶液的溫度相同,酶標(biāo)板只要取出所需量。
11)由于底物顯色劑對光及其敏感,因此要避光保存。
12)手工洗板時每次加入洗滌液后。應(yīng)靜置15~30s,不要將一個酶標(biāo)孑L中的洗滌液濺入另一酶標(biāo)孔中,防止交叉污染。甩去洗滌液后將酶標(biāo)板放在毛巾或吸水紙上拍干。
13)檢測吸光度前應(yīng)將酶標(biāo)儀打開,將其預(yù)熱30min以上。
14)底物為TMB,避免與皮膚相接觸。終止液為2tool的濃硫酸具有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸皮膚。
15)孵育的時間應(yīng)該嚴(yán)格按照試劑盒說明書上的時間為準(zhǔn)。
16)對樣本的結(jié)果有疑問時需要使用其他檢測方法進(jìn)行驗(yàn)證。
17沒有去離子水或雙蒸水時,可以使用娃哈哈純凈水配制溶液,切勿使用自來水。
18)加樣后及時放人孵箱,標(biāo)本較多時,要分批操作。按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間,防止孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。
19)顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用。
20)加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
21)合理安排檢測量,以免反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。
22)液體全部加入酶標(biāo)孔后,將酶標(biāo)板放在桌子上平行輕輕搖晃30s,使液體充分混合均勻,也使其得到充分的反應(yīng)。
23)洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
24)吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
25)要盡量做雙孔實(shí)驗(yàn),這樣才既能保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性,又能反映出試劑盒的精密度。
26)為防止樣品蒸發(fā),試驗(yàn)時將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標(biāo)板加上蓋或覆膜。
27)未使用完的酶標(biāo)板或者試劑,請于2-8℃保存。辣根過氧化物酶標(biāo)記抗人IgG工作液請依據(jù)所需的量配置使用。請勿重復(fù)使用已稀釋過的辣根過氧化物酶標(biāo)記抗人IgG工作液。
28)作時必須戴手套,穿工作衣,嚴(yán)格健全和執(zhí)行消毒隔離制度。
29)試驗(yàn)結(jié)果的判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。
30)樣品稀釋液應(yīng)用加液器加注,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性。
31)剩余樣品及廢棄物應(yīng)經(jīng)121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘,或用5.0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理30分鐘后廢棄。
32)ELISA試劑盒不同批號試劑組分不得混用。
“誠" ---在于誠實(shí)守信、堅定可靠、互相信賴,即誠信之品。人無忠信,不可立于世,言必信,行必果。至誠而不動者,未之有也;不誠未有能動者也。對客戶我們應(yīng)做到誠實(shí)守信,合作共贏,實(shí)現(xiàn)對客戶需求的*保障以及的服務(wù)體系;對團(tuán)隊(duì)我們應(yīng)做到坦誠相對,不內(nèi)杠,不起哄,任何一個率的團(tuán)隊(duì)都需要將心比心將企業(yè)價值放在前位,團(tuán)隊(duì)間需要一個凝聚力,向心力,只有我們彼此坦誠相待,才得以將工作效率更大化。
上海滬鼎堅持奉行以人為本的理念,將人性化的貼心服務(wù)帶給每一位科研工作者的同時,打造更加的品牌,我公司多年專業(yè)酶免服務(wù),是國內(nèi)更好的ELISA試劑盒供應(yīng)商之一,質(zhì)量保證,價格低,是國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室及國內(nèi)各大院校長期供應(yīng)商,本公司實(shí)驗(yàn)室可免費(fèi)提供代測服務(wù),期待您的來電!