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日期:2018-10-17瀏覽:2043次
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這類反應(yīng)的定性結(jié)果可以用肉眼判斷。目視標(biāo)本也無色或近于無色者判為陰性,顯色清晰者為陽性。但在ELSIA試劑盒中,正常人血清反應(yīng)后??沙霈F(xiàn)呈色的本底,此本底的深淺因ELISA試劑盒的組成和實(shí)驗(yàn)的條件不同而異,因此實(shí)驗(yàn)中必須加測陰性對照。
陰性對照的組成應(yīng)為不含受檢物的正常血清或類似物。在用肉眼判斷結(jié)果時,更宜用顯色深于陰性對照作為標(biāo)本陽性的指標(biāo)。此時酶催化無色的底物有色的產(chǎn)物。反應(yīng)的溫度和時間仍是影響顯色的因素。在一定時間內(nèi),陰性孔可保持無色,而陽性孔則隨時間的延長而呈色加強(qiáng)。適當(dāng)提高溫度有助于加速顯色進(jìn)行。在定量測定中,加入底物后的反應(yīng)溫度和時間應(yīng)按規(guī)定力求準(zhǔn)確。
ELISA試劑盒定性測定的顯色可在室溫進(jìn)行,時間一般不需要嚴(yán)格控制,有時可根據(jù)陽性對照孔和陰性對照孔的顯se情況適當(dāng)縮短或延長反應(yīng)時間,及時判斷。
OPD底物顯色一般在室外溫或37℃反應(yīng)20-30分鐘后即不再加深,再延長反應(yīng)時間,可使本底值增高。OPD底物液受光照會自行變色,顯色反應(yīng)結(jié)束時加入終止液終止反應(yīng)。OPD產(chǎn)物用硫酸終止后,顯色由橙黃色轉(zhuǎn)向棕黃色。
TMB受光照的影響不大,可在室溫中置于操作臺上,邊反應(yīng)觀察結(jié)果。但為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性,宜在規(guī)定的適當(dāng)時間閱讀結(jié)果。TMB經(jīng)HRP作用后ELISA試劑盒,約40分鐘顯色達(dá),隨即逐漸減弱,ELISA試劑盒至2小時后即可*消退至無色。
TMB的終止液有多種,疊氮鈉和十二烷基硫酸鈉等酶抑制劑均可使反應(yīng)終止。這類終止劑尚能使藍(lán)色維持較長時間不褪,是目視判斷的良好終止劑。此外,各類酸性終止液則會使藍(lán)色轉(zhuǎn)變成黃色,此時可用特定的波長測讀吸光值。
ELISA試劑盒產(chǎn)品優(yōu)勢您知道多少?
1.*品質(zhì):高品質(zhì)的抗體和試劑是ELISA試劑盒的基礎(chǔ);
2.特異:特異檢測目標(biāo)分子,結(jié)果可重復(fù);
3.高度靈敏:可檢測到pg/mL級別的目標(biāo);
4.種類齊全:可覆蓋人、大鼠、小鼠、棉鼠、獼猴、豬、馬、犬和貓等多個種屬;
5.優(yōu)化設(shè)計:可拆卸式96孔板(12X8),為血清、血漿、尿樣和細(xì)胞培養(yǎng)物樣本檢測進(jìn)行優(yōu)化。
6.嚴(yán)格的質(zhì)控體系:所有試劑盒從原料到成品經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)控,確保試劑盒質(zhì)量及穩(wěn)定性;
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