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ELISA試劑盒的操作法,您做對(duì)了么?

日期:2019-07-05瀏覽:885次

ELISA試劑盒的操作法,您做對(duì)了么?
上海滬鼎生物科技有限公司常年供應(yīng)ELISA試劑盒,為確保試驗(yàn)的成功,使用ELISA試劑盒時(shí)一定要注意相關(guān)的事項(xiàng),今天,我們主要介紹人白介素ELISA試劑盒操作步驟。

1. 確定本次檢測(cè)所需的已包被抗體的酶標(biāo)板孔數(shù)目。
2. 將倍比稀釋的標(biāo)準(zhǔn)品各0.1ml依次加入一排7孔中,1孔只加樣品稀釋液的作為對(duì)照。處理后的標(biāo)本按100ul每孔加入。
3. 酶標(biāo)板加上蓋,37℃反應(yīng)90分鐘。
4. 反應(yīng)后用自動(dòng)洗板機(jī)吸去酶標(biāo)板內(nèi)的液體;或甩去酶標(biāo)板內(nèi)液體,再對(duì)著吸水紙拍幾下。洗滌2次。
5. 將準(zhǔn)備好的生物素抗體工作液按每孔0.1ml依次加入。37℃反應(yīng)60分鐘。
6. 0.01M TBS或0.01M PBS洗滌3次,每次浸泡1分鐘左右。
7. 將準(zhǔn)備好的ABC工作液按每孔0.1ml依次加入。37℃反應(yīng)30分鐘。
8. 0.01M TBS或0.01M PBS洗滌5次,每次浸泡1-2分鐘左右。
9. 按每孔0.1ml依次加入TMB顯色工作液,37℃避光反應(yīng),反應(yīng)過(guò)程中,要經(jīng)常的觀察,當(dāng)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,后3-4孔差別不明顯時(shí),即可加入TMB終止液0.1ml/孔。(顯色反應(yīng)長(zhǎng)不要超過(guò)30分鐘)。
10. 用酶標(biāo)儀在450nm測(cè)定O.D.值。
11. 根據(jù)樣品的吸光值在坐標(biāo)上找出對(duì)應(yīng)的濃度。用戶(hù)也可以使用各種應(yīng)用軟件來(lái)計(jì)算。應(yīng)記住由于樣品稀釋了N倍,其實(shí)際濃度應(yīng)該×N。

上海滬鼎生物科技有限公司是國(guó)內(nèi)ELISA試劑盒供應(yīng)商,代理銷(xiāo)售不同ELISA試劑盒品牌的進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)ELISA試劑盒,專(zhuān)業(yè)供應(yīng)科研實(shí)驗(yàn)所需的培養(yǎng)基,抗體,動(dòng)物血清血漿,標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照品,化學(xué)試劑,酶聯(lián)免疫試劑盒,白介素試劑盒,金標(biāo)檢測(cè)試劑盒,微生物,蛋白質(zhì),ELISA種屬涵蓋廣,憑借多年行業(yè)經(jīng)驗(yàn),完善的售后服務(wù),高質(zhì)量的產(chǎn)品。

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