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滬鼎生物|怎樣進行細(xì)胞復(fù)蘇?

日期:2022-05-27瀏覽:739次

我公司經(jīng)營生命科學(xué)領(lǐng)域的研究試劑、儀器和實驗室消耗品,致力于向國內(nèi)生命科學(xué)研究人員提供產(chǎn)品和服務(wù)。我們代理和經(jīng)銷的分子生物學(xué)試劑、生化試劑、免疫試劑、細(xì)胞培養(yǎng)試劑、制藥工業(yè)原料、實驗儀器與消耗品、臨床診斷產(chǎn)品等,已被廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)基礎(chǔ)與開發(fā)研究、制藥、疾病診斷、人口與健康、生物技術(shù)等諸多領(lǐng)域。我們的客戶遍布大學(xué)、研究所、醫(yī)院、制藥公司、生物技術(shù)公司和工業(yè)等單位。


細(xì)胞復(fù)蘇的具體操作:


一. 實驗前準(zhǔn)備:


1.將水浴鍋預(yù)熱至37℃


2.用75%酒精擦拭紫外線照射30min的超凈工作臺臺面。


3.在超凈工作臺中按次序擺放好消過毒的離心管、吸管、培養(yǎng)瓶等等。



二.取出凍存管:


1.根據(jù)細(xì)胞凍存記錄按標(biāo)簽找到所需細(xì)胞的編號。


2.從液氮罐中取出細(xì)胞盒,取出所需的細(xì)胞,同時核對管外的編號。



三.迅速解凍:


1.迅速將凍存管投入到已經(jīng)預(yù)熱的水浴鍋中迅速解凍,并要不斷的搖動,使管中的液體迅速融化。


2.約1-2min后凍存管內(nèi)液體*溶解,取出用酒精棉球擦拭凍存管的外壁,再拿入超凈臺內(nèi)。



四.平衡離心:


用架盤天平平衡后,放入離心機中3000r/min 離心3min



五.制備細(xì)胞懸液:


1.吸棄上清液。


2.向離心管內(nèi)加入10ml培養(yǎng)液,吹打制成細(xì)胞懸液。



六.細(xì)胞計數(shù):


細(xì)胞濃度以5×105/ml為宜。



七.細(xì)胞封瓶


培養(yǎng)細(xì)胞將復(fù)合細(xì)胞計數(shù)要求的細(xì)胞懸液分裝入培養(yǎng)瓶內(nèi),將培養(yǎng)瓶放入37℃和5%CO2的培養(yǎng)箱內(nèi)2-4小時(或者24-48小時)后換液繼續(xù)培養(yǎng)培養(yǎng),換液的時間由細(xì)胞情況而定。


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