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日期:2023-06-21瀏覽:609次
一、標(biāo)本的影響
溶血標(biāo)本及混有紅細(xì)胞的血清采用ELISA法檢測(cè)易產(chǎn)生假陽(yáng)性??赡苁侨苎逯泻羞^氧化
酶物質(zhì)(紅細(xì)胞或血紅蛋白中的亞鐵血紅素),在洗滌過程中往往難以wan全洗脫,它可使H2O2釋放出原生態(tài)氧(O),從而催化底物四甲基聯(lián)苯胺生成可溶性的有色物質(zhì),即顯藍(lán)色,產(chǎn)生假陽(yáng)性。所以嚴(yán)重溶血標(biāo)本禁用。
二、標(biāo)本受細(xì)菌污染
因菌體中可能含有內(nèi)源性辣根過氧化物酶,因此,被細(xì)菌污染的標(biāo)本同溶血標(biāo)本一樣,亦可產(chǎn)
生非特異性顯色而干擾測(cè)定結(jié)果。
三、標(biāo)本保存不當(dāng)
在冰箱中保存過久的標(biāo)本,在間接法ELISA測(cè)定中會(huì)導(dǎo)致本底過深、造成假陽(yáng)性;為克服上述
干擾,elisa試劑盒測(cè)定的血清標(biāo)本宜為新鮮采集;如不能立即測(cè)定,5 d內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可存放于4℃,1周后測(cè)定的血清標(biāo)本應(yīng)低溫凍存;凍存后融解的標(biāo)本,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,應(yīng)充分混合后再測(cè)定,但混勻時(shí)應(yīng)輕柔,不可強(qiáng)烈振蕩。
塑料試管能吸附抗原物質(zhì),樣本久置在塑料管內(nèi)會(huì)使樣本內(nèi)抗原含量下降造成假陰性。
使用真空采血管;并使用非抗凝標(biāo)本,肝素抗凝血漿會(huì)增加OD值,EDTA、酶抑制劑可抑制
ELISA系統(tǒng)中辣根過氧化物酶活性。
四、標(biāo)本凝固不全
在工作中,有時(shí)為了爭(zhēng)取時(shí)間快速檢測(cè),常在血液還未開始凝固時(shí)即強(qiáng)行離心分離血清,使血
清中仍殘留部分纖維蛋白原,在ELISA測(cè)定過程中可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊,易造成假陽(yáng)性結(jié)果;因此血液標(biāo)本采集后必須使其充分凝固后再分離血清。