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ELISA分析優(yōu)缺點

日期:2023-10-20瀏覽:743次

ELISA實驗所有方法的缺點很明顯:

  1、重復性不好;

  2、收自身抗體、嗜異性抗體等干擾,易出現(xiàn)假陽性;

  3、不論儀器和手工操作,干擾因素較多。影響最大的是溫度和時間。

  

直接法(direct ELISA

  將抗原直接固定在固相載體上,參加酶符號的一級抗體,即可測定抗原總量,此一級抗體的特異性非常重要。

  優(yōu)勢:操作手續(xù)簡略,因無須運用二抗可防止交互反響。

  缺陷:實驗中的一抗都得用酶符號,但不是每種抗體都適合做符號,費用相對進步。

 

間接法(indirect ELISA

  此測定辦法與直接法相似,不一樣在于一級抗體沒有酶符號,改用酶符號的二級抗體去辨識一級抗體來測定抗原量。

  優(yōu)勢:二抗能夠加強信號,并且有多種挑選能做不一樣的測定剖析。不加酶符號的一級抗體則能保存它最多的免疫反響性。

  缺陷:交互反響發(fā)作的機率較高。

 

雙抗體夾心法(sandwich ELISA

  被檢測的抗原包被在兩個抗體之間,其間一個抗體將抗原固定于固相載體上,即捕捉抗體。另一個則是檢測抗體,此抗體可用酶符號后直接測定抗原的量;或不符號,再透過酶符號的二級抗體來測定抗原的量。這兩種抗體有必要當心選擇,才可防止交互反響或競爭一樣的抗原聯(lián)系部位。

  優(yōu)勢:高活絡、高專一性,抗原無須事前純化。

  缺陷:抗原必定得具有兩個以上的抗體聯(lián)系部位。

 

競爭法(competitive ELISA

  樣本里的抗原(自在抗原)和純化并固定在固相載體上的抗原(固定抗原)一同競爭一樣的抗體,當樣品里的自在抗原越多,就能夠聯(lián)系越多的抗體,而固定抗原就只能聯(lián)系到較少的抗體,反之亦然。經(jīng)清潔過程,洗去自在抗原和抗體的復合物,只留下固定抗原和抗體的復合物,拿來與只要固定抗原的對照組成果相比擬,依據(jù)呈色區(qū)別就可計算出樣品里的抗原含量。

  優(yōu)勢:可適用比擬不純的樣本,并且數(shù)據(jù)再現(xiàn)性很高。

缺陷:全體的敏感性和專一性都較差。

 

滬鼎是一家業(yè)經(jīng)營生物試劑、科研儀器、生物試劑、實驗耗材的公司,主要經(jīng)營ELISA試劑盒,血清,抗體,標準品,生物試劑,實驗耗材,培養(yǎng)基及實驗外包等,產(chǎn)品暢銷國內(nèi)大部分地區(qū),覆蓋面廣,產(chǎn)品齊全,價格實惠,服務周到。我司擁有雄厚的實力、合理的價格和完善的服務,能夠及時解決和滿足客戶的各方面的需求,與國內(nèi)多家企業(yè)建立了良好的長期合作關(guān)系,在市場上樹立了公司的良好信譽和形象。


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