国产欧美一区二区精品视频,精品国产福利在线观看91啪,久久久久久精品免费免费自慰,亚洲第一天堂在线观看视频

歡迎訪問上海滬鼎生物科技有限公司網(wǎng)站

返回首頁|聯(lián)系我們

全國統(tǒng)一服務(wù)熱線:

18221656311
技術(shù)文章您當(dāng)前的位置:首頁 > 技術(shù)文章 > 您看滬鼎培養(yǎng)大鼠胰島細(xì)胞,八步即能完成實(shí)驗(yàn)

您看滬鼎培養(yǎng)大鼠胰島細(xì)胞,八步即能完成實(shí)驗(yàn)

日期:2014-02-20瀏覽:913次

    這是一項(xiàng)比較熱門的實(shí)驗(yàn),如果您需要用到、了解的話可以拿出空余的兩分鐘時(shí)間來閱讀下面的文章。我們把本實(shí)驗(yàn)的步驟分為了八個(gè)部分,下面就來分條說明。 
    試劑都是有它的配制方法的,這里的實(shí)驗(yàn)是培養(yǎng)大鼠胰島細(xì)胞,在我公司中所能看見的大鼠二字也就是試劑盒方面了,其中的種屬大鼠是非常熱銷的。我們?cè)谧鲞@個(gè)實(shí)驗(yàn)的*步就是要將一周齡Wistar大鼠斷頸處死,熱愛動(dòng)漫的朋友有沒有莫名的想到了兵長呢?然后就要把它放于75%乙醇浸泡15 分鐘,無菌取出胰腺,于冰冷無菌D-Hanks’液中漂洗,用眼科剪仔細(xì)清除脂肪、包膜、血管等胰外組織,轉(zhuǎn)入青霉素小瓶中。
    第二個(gè)步驟就是要加入少量無菌D-Hanks’液,用眼科剪剪成0.1-1.0 mm3 大小的碎片,用滴管輕輕吸出上層細(xì)小脂肪碎塊和油滴,再用無菌D-Hanks’液反復(fù)清洗 8~10 次,加入10 倍體積無菌消化酶液[胰蛋白酶-膠原酶消化液:0.05  g 胰蛋白酶,0.025 g Ⅴ型膠原酶(663 U/mg),0.05 g 葡萄糖,溶于100mL 無Ca2+、Mg2+的0.01 mol/L PBS(pH 值為 7.4)溶液,用0.22 µm 微孔濾膜濾菌],38℃±1℃消化,消化過程中不斷震蕩,10 分鐘后棄去上清液。
    那么多的數(shù)字文字看上去有些眼花繚亂啊,其實(shí)操作時(shí)會(huì)發(fā)現(xiàn)沒有那么麻煩的。
    我們第三步要用無菌D-Hanks’液將組織塊清洗 2~3 次,加入新鮮酶液繼續(xù)消化,重復(fù)上述步驟,此時(shí)組織塊邊緣模糊。
    第四個(gè)步驟的時(shí)候要將組織塊浸入消化酶液中,38℃±1℃消化10 分鐘,將消化酶液與組織塊分開,組織塊重新加入新鮮消化酶液進(jìn)行消化;而原消化酶液1500  rpm離心 10 分鐘,取沉淀即為消化下的細(xì)胞,重新用無菌D-Hanks’懸浮,離心,重復(fù) 1~2 次,再用培養(yǎng)基洗 2~3 次,用培養(yǎng)基懸浮即得細(xì)胞懸液。
    實(shí)驗(yàn)過程到這里已經(jīng)說了一半了,為了完成漂亮的實(shí)驗(yàn),您在操作的時(shí)候也要注意一些小細(xì)節(jié)部分
    我們第五步的時(shí)候,要將消化過的組織塊重復(fù)消化5~6 次至組織塊消化*,重復(fù)以上操作。
    第六步,合并幾次所得細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù),調(diào)整細(xì)胞濃度為 2×105個(gè)細(xì)胞/mL,將細(xì)胞懸液接種于24 孔塑料培養(yǎng)板中,每孔1 mL,置于37℃,5%CO2,飽和濕度培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
    文章看起來前面文字密密麻麻,中間有些松散。這里也能夠看出,前面的步驟流程是比較多的,到了中間就會(huì)稍微的簡單一些,因?yàn)椴襟E上有重復(fù)上面的,做過了的再次重復(fù)就會(huì)簡單一點(diǎn)。
    到了第七步的時(shí)候,由于成纖維細(xì)胞貼壁要比胰島細(xì)胞迅速,接種15 h 后,輕輕振蕩培養(yǎng)板,將上面未貼壁的細(xì)胞接入新的培養(yǎng)板中,可除去部分成纖維細(xì)胞。
    第八步,將新培養(yǎng)板中細(xì)胞培養(yǎng) 48 小時(shí)后,換新鮮配置的含有2.5 ng/mL 的碘乙酸的培養(yǎng)基培養(yǎng)5 h,可除去絕大部分成纖維細(xì)胞,而胰島細(xì)胞不受傷害,換不含碘乙酸的培養(yǎng)基洗2 次,并換不含碘乙酸的培養(yǎng)基在 37℃、5% CO2,飽和濕度培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
    我們要每隔3天換培養(yǎng)液,獲得單層胰島細(xì)胞。
    您看滬鼎培養(yǎng)大鼠胰島細(xì)胞,八步即能完成實(shí)驗(yàn)。開學(xué)迎來,您需要大鼠elisa試劑盒的話現(xiàn)在個(gè)訂購七折優(yōu)惠!本實(shí)驗(yàn)中我們需要用到的試劑有:
1、D-Hanks’液
2、蛋白酶
3、Ⅴ型膠原酶
4、葡萄糖
5、碘乙酸
     歡迎您購買我公司產(chǎn)品,在您實(shí)驗(yàn)的過程中,如果遇到了產(chǎn)品以及技術(shù)的問題來電即可,我們將為您安排技術(shù)人員給您做全程的實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)。

上一篇:滬鼎推薦本周Z值得關(guān)注的實(shí)驗(yàn),述制備核提取物的完整過程

下一篇:滬鼎化學(xué)實(shí)驗(yàn)“制作”五水硫代硫酸鈉的過程

企業(yè)qq 聯(lián)系方式 二維碼

服務(wù)熱線

18221656311

掃一掃,添加微信

临武县| 巩义市| 拉孜县| 平阳县| 吴川市| 石门县| 山东省| 亳州市| 平乡县| 五华县| 师宗县| 德惠市| 银川市| 方山县| 洞口县| 简阳市| 化隆| 尚志市| 临澧县| 宣恩县| 高雄县| 珲春市| 营口市| 赣榆县| 常熟市| 黄浦区| 石林| 林芝县| 札达县| 张家港市| 太谷县| 江孜县| 海阳市| 四子王旗| 县级市| 桃源县| 叙永县| 凌源市| 丰县| 曲阳县| 原平市|