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日期:2014-09-12瀏覽:1837次
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根據(jù)Lequin追述了EIA/ELISA技術(shù)的發(fā)展,從60年代該技術(shù)的提出,到后來該項技術(shù)在生物化學(xué)分析領(lǐng)域的廣泛應(yīng)用。當我們在Oranon開始我們的計劃時,我們并沒有想到該技術(shù)能奠定將來數(shù)以億計的實驗室分析基礎(chǔ)。我們開展這個項目的初衷只是由于當時Oranon管理部門熱衷于多年前免疫化學(xué)診斷妊娠的成功。
但是由于工程太大,需耗時較多而阻止了該項技術(shù)的的深入發(fā)展。以一種簡易的可以根據(jù)顏色變化而即插即讀的試紙條作為基礎(chǔ),似乎可以取得進一步的成功。所以,當Schuurs提出將酶附著于抗原或者抗體,通過化學(xué)反應(yīng)的測定終產(chǎn)物顏色這一設(shè)想時,大家都表示了贊同。當然,我們采用了分析妊娠HCG來作為我們研究的模型。盡管如此,Schuurs對于這項技術(shù)將來的應(yīng)用仍然非常清楚。正象他在試驗建議的zui后一句話所說的那樣:我認為,探索這項技術(shù)所取得的任何成功,都將開辟免疫學(xué)診斷的新領(lǐng)域。
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我們早期的研究還是取得了一定的成績,至少在試驗原理上,但是當我們發(fā)展以EIA技術(shù)為基礎(chǔ)的根據(jù)顏色變化而診斷妊娠的即插即讀的技術(shù)時,我們還是失敗了,雖然我們竭盡全力。將許多必需的試劑壓縮到一個試紙條上,并且在模板上使反應(yīng)過程標準化,在哪個時間看起來還需要解決很多技術(shù)問題。實際上,在Oranon研究組發(fā)現(xiàn)了溶膠顆粒免疫測定技術(shù)發(fā)明后,依靠顏色變化診斷妊娠的問題也就變得可行了。取而代之的,我們轉(zhuǎn)移到了其他應(yīng)用方面。
同時,我們也注意到了Engvall和Perlmann以及隨后的學(xué)者開展的關(guān)于ELISA和EIA的研究,我們zui感興趣的應(yīng)用領(lǐng)域是細菌、寄生蟲和病毒,尤其是London的Voller、Bidwell以及荷蘭國家公共衛(wèi)生研究所的Ruitenberg所做的工作。我們也意識到和當時比較笨拙的方法如免疫熒光,血清凝集實驗,補體結(jié)合實驗相比,ELISA和EIA法的簡易性使其在廣泛的微生物感染診斷中獲得了快速的發(fā)展。這就迅速為大家所接受,并且促進了眾多的生物醫(yī)學(xué)實驗室和第三世界的國家建立了一種可靠的感染性疾病診斷方法。當時,這種方法只被局限地應(yīng)用于少數(shù)高度專業(yè)的實驗室。Voller和Bidwell首先應(yīng)用了96孔微板用于EIA/ELISA實驗,由此也引發(fā)了*次免疫分析自動化的浪潮。我們在Oranon也輕易地接受了該方法用于檢測乙型肝炎和其他獻血篩查項目。
EIA和ELISA在內(nèi)分泌學(xué)和腫瘤學(xué)方面的應(yīng)用較感染性疾病要慢得多,因為在這些領(lǐng)域,RIA法已是捷足先登。EIA和ELISA技術(shù)的性和靈敏度都落后于已經(jīng)較成熟了的RIA法。而且很多實驗室都已經(jīng)配備了放射性核素的相關(guān)設(shè)備,并且習(xí)慣了與之開展工作,他們還不能意識到非同位素檢測的優(yōu)勢。是自動化改變了這些,RIA的自動化牽涉到放射性同位素引起的容器和廢物處理問題,而EIA和ELISA卻使全自動隨機存取的免疫分析系統(tǒng)成為可能,該系統(tǒng)正是80年代診斷儀器商努力開拓的方向。這就導(dǎo)致了許多低成本的、設(shè)備簡單,可靠性強的免疫化學(xué)診斷方法從專業(yè)的放射性實驗室進入了普通化學(xué)實驗室。EIA和ELISA也因此找到了他在診斷感染性疾病以外的應(yīng)用領(lǐng)域。
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