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日期:2019/4/12瀏覽:643次
宋海燕,劉 波,張駿飛,董 靜,郭 遠(yuǎn),劉利偉,陳從新
【摘要】 目的 探討細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞(CIK)輸注聯(lián)合經(jīng)動(dòng)脈插管化療栓塞術(shù)(TACE)治療原發(fā)性肝癌患者延緩門靜脈癌栓形成的可能性。方法 選擇 2010 年 1 月~2014 年 12 月我院收治的原發(fā)性肝癌患者 44 例,22 例接受 TACE 聯(lián)合CIK 細(xì)胞輸注治療,另 22 例只接受 TACE 治療。采用Ficoll 兩步分離法分離外周血單個(gè)核細(xì)胞,經(jīng) IFN-γ、抗 CD3 單克隆抗體和 IL-2 誘導(dǎo),使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞 CD 抗原表達(dá)鑒定 CIK 細(xì)胞培養(yǎng)成功, 常規(guī)行 TACE 治療,在 TACE 治療半月后輸注 CIK 細(xì)胞懸液 3 次,細(xì)胞總數(shù)為 1.0×109。治療前后行腹部 CT 檢查, 確定門靜脈栓子形成情況。結(jié)果 治療后 1 m、3 m 和 6 m,聯(lián)合組患者門靜脈癌栓發(fā)生率分別為 4.5%、13.6%和27.2%,而 TACE 組則分別為 9.0%、45.5%和 63.6%(P<0.05);在治療 3 月時(shí),聯(lián)合組腫瘤大小為(4.77±1.27)cm,顯著低于 TACE 組([ 5.54±1.14)cm,P<0.05];在治療 3 月時(shí),聯(lián)合組血清甲胎蛋白水平為(83.14±31.91) ng/ml,也顯著低于 TACE 組[(139.24±98.76) ng/ml,P<0.05];兩組肺部、顱腦和骨骼等遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移發(fā)生率無(wú)顯著性差異(P>0.05)。結(jié)論 CIK 細(xì)胞輸注聯(lián)合 TACE 可明顯減緩原發(fā)性肝癌患者門靜脈栓子形成的時(shí)間,改善肝功能,同時(shí)能有效控制腫瘤的生長(zhǎng)及擴(kuò)散。
【關(guān)鍵詞】 原發(fā)性肝癌;門靜脈癌栓;細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞;過(guò)繼免疫療法;經(jīng)動(dòng)脈插管化療栓塞術(shù)
原發(fā)性肝癌是常見的消化道惡性腫瘤。研究顯 示,原發(fā)性肝癌的發(fā)生率有明顯上升的趨勢(shì)[1]。肝癌
作者單位:230031 合肥市 第 105 醫(yī)院感染病科
作者:宋海燕,女,33 歲,主治醫(yī)師。從事肝病臨床工作
患者早期無(wú)特異性臨床表現(xiàn),發(fā)現(xiàn)時(shí)多已發(fā)生腫瘤轉(zhuǎn)移。由于肝臟血供豐富,且為雙重血液供應(yīng),肝癌一般首先發(fā)生肝內(nèi)轉(zhuǎn)移,而門靜脈栓子形成就是一種常見的類型。因癌栓形成后明顯增加了上消化道出血的風(fēng)險(xiǎn),給進(jìn)一步治療帶來(lái)難度。因此,預(yù)防癌栓形成尤為重要。對(duì)于伴有門靜脈栓子形成的肝癌患者,能耐受手術(shù)者應(yīng)手術(shù)剝除治療,并可在此基礎(chǔ)上經(jīng)肝動(dòng)脈或門靜脈置管灌注化療,這是目前比較理想的治療方法。還有其它一些微創(chuàng)治療方案,如超聲微波消融、放療及門靜脈內(nèi)置支架等。這些治療方法的共同缺點(diǎn)是無(wú)法防止腫瘤復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移。近年來(lái),有學(xué)者采用細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞(Cytokine-induced killer cells,CIK)輸注,作為一種全身治療方法,可能會(huì)達(dá)到防止肝癌轉(zhuǎn)移或控制遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移灶發(fā)展的效果[2~4]。本研究采用 CIK 輸注聯(lián)合經(jīng)動(dòng)脈插管化療栓塞術(shù) (Transcatheter arterial chemoembolization, TACE) 治療原發(fā)性肝癌患者,觀察治療后門靜脈癌栓形成及肝內(nèi)腫塊大小變化情況,發(fā)現(xiàn)該聯(lián)合治療能有效控制腫瘤生長(zhǎng),并明顯降低門靜脈癌栓的發(fā)生率。
1資料與方法
1.1 一般資料 自 2010 年 1 月~2014 年 12 月我院收治的原發(fā)性肝癌患者 44 例,男性 41 例,女性 3 例;年齡 33~68 歲,平均年齡(42.6±8.3)歲。所有患者診斷符合《原發(fā)性肝癌診療規(guī)范(2011 年版)摘要》[5] 標(biāo)準(zhǔn),不伴有門靜脈栓子,同時(shí)無(wú) TACE 治療禁忌證者入選。在入選患者中,接受單一 TACE 治療者 22 例,另 22 例在 TACE 治療的基礎(chǔ)上給予靜脈輸注 CIK 細(xì)胞懸液治療。治療前,兩組患者各項(xiàng)指標(biāo)比較均無(wú)顯著性差異。伴有門靜脈栓子或其他部位轉(zhuǎn)移者或有 TACE 治療禁忌證者被除外。
1.2CIK 細(xì)胞的分離、純化和培養(yǎng) 采用 Ficoll 兩步分離法分離出外周血單個(gè)核細(xì)胞,用含血清培養(yǎng)基調(diào)整細(xì)胞數(shù)為 1~5×106/ml,在 37℃,5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng),于培養(yǎng)的第 1 d 加入終濃度為 1000U/ml 的 IFN-γ(上海滬鼎生物科技有限公司);第 2d 加入終濃度為 100 ng/ml 抗 CD3 單克隆抗體[妙通(上海)生物科技有限公司]、1000 U/ ml 的 IL-2(上海常斤生物科技有限公司),而后每隔 1~2 d加入新鮮的含 1000 U/ml 的 IL-2 *培養(yǎng)液,并調(diào)細(xì)胞數(shù)為 1~5×106/ml,繼續(xù)培養(yǎng)、傳代,定期補(bǔ)充抗 CD3 和IL-2。使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞 CD 抗原的表達(dá)情況。同時(shí)取培養(yǎng)上清行乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、HIV 和梅毒感染標(biāo)志物檢測(cè),行細(xì)菌培養(yǎng)、真菌培養(yǎng),檢測(cè)抗支原體 -IgG 和內(nèi)毒素水平。
1.3治療方法 所有患者每月行常規(guī) TACE 治療 1 次,治療組 22 例患者在此基礎(chǔ)上接受 CIK 細(xì)胞治療,即在 TACE 治療半月后輸注 CIK 細(xì)胞懸液,連續(xù)或隔日輸注 1 次,共 3 次,細(xì)胞總數(shù)為 1.0×109。
1.4檢測(cè)與檢查 常規(guī)檢測(cè)血清甲胎蛋白(Alpha fetal protein, AFP)、血清總膽紅素 (Total serum bilirubin, TBIL)、血清白蛋白(Serum albumin, Alb)和凝 血 酶 原 時(shí) 間 標(biāo) 準(zhǔn) 化 比 值(International normalized ratio, INR)等。連續(xù)觀察 6 個(gè)月。每次治療前所有患者均行肝臟增強(qiáng) CT 掃描,評(píng)估腫瘤大小及轉(zhuǎn)移情況,并了解有無(wú)門靜脈癌栓形成。
1.5統(tǒng)計(jì)方法 應(yīng)用 SPSS 17.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,組間發(fā)生率的差異比較采用 x2 檢驗(yàn),兩組間生化指標(biāo)和腫瘤大小的計(jì)量資料以(x依s)表示,采用不 成對(duì)樣本的 t 檢驗(yàn)。P<0.05 表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2結(jié)果
2.1門靜脈癌栓形成情況 在治療結(jié)束后 6 個(gè)月, 兩組患者門靜脈栓子形成情況見表 1 和圖 1。
表 1 兩組門靜脈癌栓發(fā)生情況(%)的比較
例數(shù) 1 m 3 m 6 m CIK 22 1(4.5) 3(13.6) 6(27.2)①
TACE 22 2(9.0) 10(45.5) 14(63.6)淤P<0.05
2.2療效情況 在治療后,兩組患者血清 AFP 均有不同程度的降低;在治療 3 月時(shí),兩組間 AFP 水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);在 TACE 治療后對(duì)照組腫瘤生長(zhǎng)速度得到有效的控制,短時(shí)間內(nèi)未明顯增大,治療組幾乎所有患者腫瘤都停止增大,治療 3 月時(shí)兩組間腫瘤直徑大小差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義
(P<0.05,表 2)。表 2 兩組血清 AFP 和腫塊大?。▁依s)的比較
例數(shù) AFP(ng/ml) 腫塊大小 (cm)
CIK 治療前 22 142.09依103.15 5.97依1.33 治療后 3 m 22 83.14依31.91淤 4.77依1.27 治療后 6 m 22 85.53依33.12于 4.12依1.65盂
TACE 治療前 22 156.23依109.58 6.37依1.37
治療 3 m 22 139.24依98.76 5.54依1.14
治療后 6 m 21 140.03依101.13 4.95依1.34
與 TACE 組比,淤t=1.759,P=0.038;于t=1.873,P=0.027;盂t= 1.826,P=0.040
2.3肝功能的變化情況 在治療的早期,兩組肝功能指標(biāo)均有輕度改善。自治療 3 月后直至隨訪結(jié)束,兩組間血清TBIL 水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);血清 Alb 和 INR 指標(biāo)在兩組間比較,差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05,表 3)。
表 3 兩組血清肝功能指標(biāo)(x依s)的比較 Alb(g/L) TBIL(滋mol/L) INR
治療前 治療 3 月 治療前 治療 3 月 治療前 治療 3 月治療組 37.6依5.4 35.9依10.240.6依12.9 29.5依9.9 1.23依0.08 1.24依0.06 對(duì)照組 36.9依7.8 35.4依7.5 62.7依20.850.4依22.7 1.23依0.09 1.23依0.07
t 6.216 6.164 5.896 15.265 1.431 1.386
P >0.05 >0.05 >0.05 <0.05 >0.05 > 0.05
2.4遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移情況 兩組患者遠(yuǎn)處腫瘤轉(zhuǎn)移主要發(fā)生在肺、膽管系統(tǒng)、胸壁、腦和腰椎,但兩組轉(zhuǎn)移發(fā)生率無(wú)顯著性差異(P>0.05,表 4)。
表 4 兩組遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移發(fā)生情況(%)的比較
例數(shù) 1 m 3 m 4 m 5 m 6 m 治療組 22 0(0.0) 0(0.0) 1(4.5) 1(4.5) 2(9.0) 對(duì)照組 22 0(0.0) 1(4.5) 1(4.5) 2(9.0) 3(13.6)
3討論
CIK 細(xì)胞是新近發(fā)展起來(lái)的過(guò)繼免疫細(xì)胞。由于CIK 細(xì)胞具有增殖速度快,抗腫瘤能力強(qiáng),而且在細(xì)胞的數(shù)量上能滿足臨床的需要等特點(diǎn),因而臨床應(yīng)用前景較好。目前,CIK 細(xì)胞輸注已廣泛應(yīng)用于臨床疾病的治療[6~10],如肝癌、結(jié)腸癌、腎癌等。大量的臨床研究資料顯示[8],CIK 細(xì)胞輸注治療可以提高患者的免疫功能及生存質(zhì)量,有助于提高療效,延長(zhǎng)患者的生存期。目前,使用的 CIK 細(xì)胞來(lái)源有自身外周血、同種異體外周血或臍帶血等。
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