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日期:2015-01-04瀏覽:587次
前言:經(jīng)過長時間的閱讀記錄,ELISA的概念與操作方法已經(jīng)可以熟練的掌握,但是不少老師發(fā)現(xiàn),到了真正實踐的時候卻很容易弄錯。這到底是為什么呢?難道是試劑盒的選擇出錯了?其實ELISA試劑盒實踐與采選并非難事,具體原因請聽上海滬鼎分析。
一、論試劑盒原料的重要性
主要影響免疫測定技術(shù)的基礎(chǔ)在于抗原抗體之間的特異結(jié)合反應(yīng),所以任何的診斷試劑離不開的原料,以前用于免疫測定的抗原通常為各種純化抗原,而抗體則為純化抗原免疫動物后獲得的多克隆抗體和使用雜交瘤技術(shù)得到的單克隆抗體,而抗原或抗體的標(biāo)記物如酶標(biāo)結(jié)合物則通過各種化學(xué)合成方法制備。
隨著市場的快速成熟,目前中國對于酶聯(lián)免疫吸附分析方法研究上的技術(shù)已經(jīng)非常成熟,目前由國內(nèi)自主研發(fā)的試劑盒和國外的試劑盒在質(zhì)量可以持平,做出來的數(shù)據(jù)已經(jīng)達(dá)到相同的技術(shù)指標(biāo)。
二、ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線弱的原因
它們對于蛋白(抗原)的吸附能力是不同的。ELISA發(fā)生在固相表面,需要其有較強的吸附蛋白的能力,而培養(yǎng)細(xì)胞的96孔板,尤其是用于培養(yǎng)粘附細(xì)胞的板子,都是經(jīng)過特殊處理的,不能混用。如果換了板子標(biāo)曲還是不好,就要考慮封閉步驟,標(biāo)準(zhǔn)樣品和酶連二抗的問題了。
三、對試劑盒的供應(yīng)商選擇,千萬不要盲目跟風(fēng)
現(xiàn)在國內(nèi)的試劑盒供應(yīng)商不在少數(shù),大家也不能盲目跟風(fēng)選擇??梢远嗦犅犐磉吶说慕ㄗh。其實現(xiàn)在國產(chǎn)試劑盒技術(shù)已經(jīng)很成熟了,甚至都快超過國外的那些試劑盒了技術(shù)水平。其實也需要大家功能努力,確保國內(nèi)產(chǎn)品也可以得到快速的發(fā)展。
科學(xué)實驗講求重復(fù)性,一般試劑盒,其板內(nèi)和板間變異系數(shù)應(yīng)該控制在15%以內(nèi)。在選擇試劑盒時,要通過閱讀相應(yīng)的說明書或咨詢廠家試劑盒的相關(guān)技術(shù)參數(shù)。
ELISA試劑盒實踐結(jié)果與正確的產(chǎn)品采選也是有著密切的關(guān)系,每個步驟的出錯都是有原因的。我公司試劑盒提供完善的技術(shù)服務(wù),如有所需,,上海滬鼎隨時恭候您。