服務(wù)熱線
18221656311
歡迎訪問上海滬鼎生物科技有限公司網(wǎng)站
日期:2015-05-21瀏覽:579次
怎樣處理ELISA實驗結(jié)果?
1.ELISA實驗中樣品都要做復孔或三孔,然后計算每個濃度標準品的平均OD值,復孔的變異系數(shù)應(yīng)該小于20%。
2.平均OD值減去空白孔的OD值。
3.制作標準曲線。
以減去本底后的OD值為X軸,標準品的濃度為Y軸,利用作圖軟件得出一個合適的計算方法。建議使用合適的軟件來作圖,比如CurveExpert 1.4。這款軟件能夠給出很多種方法(比如直線、半對數(shù)、對數(shù)、四參數(shù)方程等)并從中選擇一條zui合適的方程。要想檢驗?zāi)硹l曲線是否與表中數(shù)據(jù)吻合,可以將標準品的濃度作為未知數(shù),將對應(yīng)的OD值帶入該方程,計算出標準品的濃度,得到的結(jié)果應(yīng)該與實際濃度很接近(+/-10%)。選擇擬合度zui高的那條曲線。
4.對于OD值落在標準曲線之外的情況
如果樣品的OD值超過標準曲線的zui高值,在實驗前應(yīng)該先將樣品稀釋從而得到準確的濃度。樣品的zui終度應(yīng)該是計算出的濃度乘以稀釋倍數(shù)。