服務(wù)熱線
18221656311
歡迎訪問上海滬鼎生物科技有限公司網(wǎng)站
產(chǎn)品型號:MIP-3β/ELC/CCL19
廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
所在地:上海市
更新時間:2015-12-23
產(chǎn)品簡介:
品牌 | R&D/美國 |
---|
【名稱】:人巨噬細(xì)胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA試劑盒
【規(guī)格】:48T/96T
【方法】:酶聯(lián)免疫法/酶免法(ELISA)
【性狀】: 液態(tài)
【Elisa試劑盒種屬】馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
【標(biāo)本】血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等
【用途】:科研 實(shí)驗
【貯存】: 貯存于2℃-8℃.如有需要,我們將竭城為顧客提供售前,售中,售后的*服務(wù)!
人巨噬細(xì)胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA試劑盒樣品收集、處理及保存
1).細(xì)胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無菌管收集細(xì)胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
2)細(xì)胞:用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次,調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104-106/ml 左右,通過反復(fù)凍融,使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,或者細(xì)胞超聲粉碎,離心取上清液檢測。
3)血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測。
4)血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
5)體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
6.)組織標(biāo)本:切取組織標(biāo)本,稱取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進(jìn)行檢測。
樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
7)保存:如果樣品不能立即檢測,應(yīng)將其分裝,-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。血液標(biāo)本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
人巨噬細(xì)胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA試劑盒操作步驟
1)取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置30分鐘。
2)分組:取出96孔板,根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品組(6個濃度)、空白孔、待測樣品組。
3)標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:準(zhǔn)備小試管6 只,依次編好號碼,先在各小試管中加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液100ul,然后取原濃度標(biāo)準(zhǔn)品100ul加入一只已編好號的試管中,充分混勻;再在該試管中取100ul 加入第二支試管中,充分混勻;再在該試管中取100ul加入第三只試管中,充分混勻;再在該試管中取100ul 加入第四只試管中,充分混勻;再在該試管中取100ul加入第五只試管中,充分混勻;然后在該試管中取100ul,棄掉。第六只試管作為0 號標(biāo)準(zhǔn)品。
注:為減少實(shí)驗誤差,保證準(zhǔn)確性,建議設(shè)置復(fù)孔。
4)加樣:依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入50ul的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中;空白對照孔加入50ul的蒸餾水;其余微孔中先加樣品40ul然后再加生物素標(biāo)記的抗體10ul。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
5)溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。
6)洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30 秒棄去,如此重復(fù)5 次,拍干。
7)加酶標(biāo)溶液:標(biāo)準(zhǔn)品組、待測樣本組各孔中加入50ul的酶標(biāo)溶液(空白對照孔除外)。
8)溫育:酶標(biāo)板用封板紙密封后,放入濕盒內(nèi)于37℃恒溫孵育1小時。
9)洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,靜置15-30s,充分清洗酶標(biāo)板5次,用吸水紙*拍干。
10)顯色:各孔加入顯色劑A液50ul后,再加入顯色劑B液50ul。
11)終止:25-37℃下避光反應(yīng)10-15分鐘,加入50ul終止液。
12)讀板:在450nm波長讀取各孔的OD值。
注:讀板時必須拭干板底殘留的液體和手指痕跡,讀板時間控制在終止反應(yīng)后的30分鐘內(nèi),以免影響準(zhǔn)確性。
數(shù)據(jù)計算
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,即為樣品的實(shí)際濃度。
人巨噬細(xì)胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA試劑盒注意事項
1)實(shí)驗操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染。
2)加樣:加樣時,要控制加樣速度,避免*孔與zui后一孔間的時間間隔過大,否則將會導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時間,從而影響實(shí)驗的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性。
3)孵育:嚴(yán)格按照說明書上規(guī)定的孵育時間和溫度進(jìn)行。
4)反應(yīng)時間的控制:加入底物后請定時觀察反應(yīng)孔的顏色變化,如果顏色較深,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
5)建議實(shí)驗前預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高,應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋,計算結(jié)果時乘以相應(yīng)的稀釋數(shù)。
6)建議使用本試劑盒時先做預(yù)實(shí)驗(即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線,試用幾個標(biāo)本),如果對本試劑盒有任何疑問,可和所購經(jīng)銷商,如果因運(yùn)輸過程導(dǎo)致試劑盒失效,可要求調(diào)換,但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。
人巨噬細(xì)胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA試劑盒退換貨政策
若發(fā)生退換貨需求,請先致電客服人員。符合退換貨政策的,我司將與您簽訂退換貨協(xié)議,并根據(jù)協(xié)議進(jìn)行退換貨。
特別說明,以下情況不予辦理退換貨:
1、客戶在訂購產(chǎn)品時請仔細(xì)確認(rèn)后再行訂購,由客戶選型失誤而造成的退貨需求,我方不承擔(dān)任何責(zé)任。產(chǎn)品大多性質(zhì)較為特殊,存儲方式復(fù)雜,請用戶按照貯存條件說明妥善保存。
2、已超過受理期限的產(chǎn)品;
3、產(chǎn)品無標(biāo)簽,或標(biāo)簽已無法識別是否屬于我司試劑的產(chǎn)品;
4、密封產(chǎn)品原包裝打開,一次性封貼或膠條破損(質(zhì)量問題除外);
5、產(chǎn)品已使用(質(zhì)量問題除外);
6、由于您的操作原因、使用環(huán)境限成的誤報以及實(shí)際情況與您描述不符,我司將不予受理申請退貨;
7、涉及產(chǎn)品退回,客戶需要與我們客服人員并按照相關(guān)指導(dǎo)操作運(yùn)輸事宜。
相關(guān)產(chǎn)品展示:
人巨噬細(xì)胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)ELISA試劑盒
人巨噬細(xì)胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA試劑盒
人巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA試劑盒
人巨噬細(xì)胞來源的趨化因子(MDC/CCL22)ELISA試劑盒
人巨噬細(xì)胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA試劑盒