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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱:

人ELISA試劑盒,人纖溶酶原激活劑ELISA試劑盒說明書

產(chǎn)品型號:

廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家

所在地:上海市

更新時間:2016-01-04

產(chǎn)品簡介:

人纖溶酶原激活劑(PLGA)ELISA試劑盒抗原或抗體可通過共價鍵與酶連接形成酶結(jié)合物,而此種酶結(jié)合物仍能保持其免疫學 和酶學活性。

產(chǎn)品特性Product characteristics
品牌R&D/美國

Elisa試劑盒簡單介紹:

【產(chǎn)品名稱】:人纖溶酶原激活劑(PLGA)ELISA試劑盒

【英文名稱】:Human plasminogen activator,PLGA ELISA KIT

【檢測種屬】:人、大鼠、小鼠等動植物。

【產(chǎn)品用途】:被測樣品定性或定量分析

【產(chǎn)品規(guī)格】:48T、96T

【檢測方法】:酶免法/酶聯(lián)免疫法(ELISA)

【保存條件】:2-8℃

【供 貨 期】:1-3天(現(xiàn)貨供應(yīng))

【產(chǎn)品性狀】:液體盒裝

【服務(wù)優(yōu)勢】:全程提供ELISA實驗技術(shù)指導和ELISA試劑盒免費代測

【樣本儲存】:收集標本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對收集后當天進行檢測的標本,儲存在4℃?zhèn)溆?,如有特殊原因需要周期收集標本,將標本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復凍融。標本2-8℃可保存48小時,-20℃可保存1個月。-70℃可保存6個月。部分激素類標本需添加抑肽酶。

人纖溶酶原激活劑(PLGA)ELISA試劑盒操作步驟

1、準備:從冰箱取出試劑盒,室溫復溫平衡30分鐘。

2、配液:用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液。

3、加標準品和待測樣本:取足夠數(shù)量的酶標包被板,固定于框架上,分別設(shè)置標準品孔、待測樣本孔和空白對照孔,記錄各孔位置,在標準品孔中加入標準品50μL;待測樣本孔中先加入待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL(即樣本稀釋5倍);每孔再加入酶標工作液100μL;空白對照孔不加。

4、溫育:37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5、洗板:棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機按說明書操作洗板)。

6、顯色:每孔先加入顯色劑A 液50μL,再加入顯色劑B液 50μL,37℃避光顯色15min。

7、終止:取出酶標板,每孔加終止液50μL,終止反應(yīng)(顏色由藍色立轉(zhuǎn)黃色)。

8、測定:以空白孔調(diào)零,在終止后15分鐘內(nèi),用450nm波長測量各孔的吸光值(OD值)。

9、計算:根據(jù)標準品的濃度及對應(yīng)的OD值,計算出標準曲線的直線回歸方程,再根據(jù)樣本的OD值,在回歸方程上計算出對應(yīng)的樣品濃度,也可以使用各種應(yīng)用軟件來計算。zui終濃度為實際測定濃度乘以稀釋倍數(shù)。

人纖溶酶原激活劑(PLGA)ELISA試劑盒的基本原理有這幾條: 

  1.抗原或抗體能以物理性地吸附于固相載體表面,可能是蛋白和聚苯乙烯表面間的疏水 性部分相互吸附,并保持其免疫學活性;  

  2.抗原或抗體可通過共價鍵與酶連接形成酶結(jié)合物,而此種酶結(jié)合物仍能保持其免疫學 和酶學活性; 

  3.酶結(jié)合物與相應(yīng)抗原或抗體結(jié)合后,可根據(jù)加入底物的顏色反應(yīng)來判定是否有免疫反 應(yīng)的存在,而且顏色反應(yīng)的深淺是與標本中相應(yīng)抗原或抗體的量成正比例的,因此,可以按底物顯色的程度顯示試驗結(jié)果。 

人纖溶酶原激活劑(PLGA)ELISA試劑盒實驗中封閉

  1.ELISA實驗中,蔗糖本身沒有封閉作用;

  2.封閉液一般是BSA、酪蛋白等或者是Tween等。

  3.加蔗糖的主要目的是保護ELISA板子吸附(包被)的蛋白,起到“保護劑”的作用。

  4.蔗糖溶液一般在ELISA板子經(jīng)過BSA封閉后加,當然也有將蔗糖加到封閉液中同時進行處理。

人纖溶酶原激活劑(PLGA)ELISA試劑盒的操作技術(shù)有哪些影響?

  1.合理安排檢測量,以免反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。

  2.加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。

  3.嚴格按照試劑說明書進行操作。操作前將試劑在室溫下平衡30~60min。

  4.加樣后及時放人孵箱。標本較多時,要分批操作。按說明步驟嚴格控制操作時間,防止孵育時間人為延長,導致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。

  5.封板溫育時,各孔一定要封嚴,防止陽性標本的液體蒸發(fā),產(chǎn)生周邊現(xiàn)象從而導致“花板”的出現(xiàn)。

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