產(chǎn)品型號(hào)：

廠(chǎng)商性質(zhì)：生產(chǎn)廠(chǎng)家

所在地：上海市

更新時(shí)間：2016-01-28

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

一、人骨橋素(OPN)ELISA試劑盒簡(jiǎn)介

【檢測(cè)方法】：酶聯(lián)免疫法/酶免法(ELISA)

【產(chǎn)品性狀】：96T/48T，盒裝液體(兩種統(tǒng)一規(guī)格)

【貯藏條件】：2-8°C

【有 效 期】：二年，我公司Elisa試劑盒均為批次，可放心購(gòu)買(mǎi)。

【主要成分】：酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。

【種    屬】馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚(yú)、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉(cāng)鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動(dòng)植物。

【產(chǎn)品單價(jià)】（ELISA試劑盒具體折扣），可免費(fèi)代測(cè)，含稅含運(yùn)費(fèi)。

【標(biāo)    本】血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等

注：標(biāo)本必須為液體，不含沉淀。

公司實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備清單：

酶 標(biāo) 儀：芬蘭（Labsystems Multiskan MS）

儀器型號(hào)：352型

洗 板 機(jī)：芬蘭（Thermo Labsystems）

儀器型號(hào)：AC8

離 心 機(jī)：微量高速離心機(jī)（國(guó)產(chǎn)）

儀器型號(hào)：TG16W

培 養(yǎng) 箱：隔水式恒溫培養(yǎng)箱（國(guó)產(chǎn)）

儀器型號(hào)：GNP-9080型

電鏡儀器：美國(guó)FEI公司臺(tái)式掃描電鏡Phenom

儀器型號(hào)：TY-HRC

實(shí)時(shí)定量PCR (RT-PCR): 羅氏

儀器型號(hào)：Lightcycler 480

免疫熒光：Modulus™

四、儲(chǔ)存及有效期 

于2～8℃避光保存，有效期為12個(gè)月。 

包被板開(kāi)封后請(qǐng)于2～8℃避光保存，避免受潮。使用期限為2個(gè)月。 

二、人骨橋素(OPN)ELISA試劑盒操作步驟 

（一）樣品準(zhǔn)備 

1.取動(dòng)物全血按常規(guī)方法制備血清，要求血清清亮，無(wú)溶血、無(wú)污染。樣品1周內(nèi)可于2～8℃保存，長(zhǎng)期需置-20℃保存。 

2.用樣品稀釋液將待檢血清按100倍稀釋?zhuān)ㄈ?μl血清加入198μl樣品稀釋液中，混勻）。陰、陽(yáng)性對(duì)照不用稀釋。 

3.濃縮洗滌液使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫使沉淀溶解，然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋。 

（二）檢驗(yàn)方法 

1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘，恢復(fù)至室溫。 

2.取所需用量酶標(biāo)板條，設(shè)空白對(duì)照1孔、陰性/陽(yáng)性對(duì)照各2孔，未用的板條盡快密封，2～8℃保存。 

3.空白對(duì)照孔加樣品稀釋液100μl；陰、陽(yáng)性對(duì)照孔分別加入陰、陽(yáng)性對(duì)照100μl；樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100μl。 

4.混勻，置37℃反應(yīng)30分鐘。 

5.扣去孔內(nèi)液體，每孔加滿(mǎn)洗滌液，靜置30秒后棄去，重復(fù)洗滌5次，拍干。 

6.每孔加酶標(biāo)記物100μl（空白孔除外）。置37℃反應(yīng)30分鐘。 

7.洗滌，同步驟5。 

8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl，混勻，37℃避光反應(yīng)10分鐘。 

9.每孔加終止液50μl，混勻，用空白孔調(diào)零，于450nm(可用630nm作參比波長(zhǎng)）測(cè)定各孔吸光值（A值）。 

ELISA實(shí)驗(yàn)在做到嚴(yán)格要求的同時(shí)有著一些不能忽視的小細(xì)節(jié)：

 1.用槍吸取液體時(shí)速度不能太快，以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。

 2.液體全部加完后，可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒，混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。

 3.洗液不夠時(shí)，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)期保存。

 4.吸取液體時(shí)，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。

三、人骨橋素(OPN)ELISA試劑盒注意事項(xiàng)

1. 當(dāng)混合蛋白溶液時(shí)應(yīng)盡量輕緩，避免起泡。

2. 洗滌過(guò)程非常重要，不充分的洗滌易造成假陽(yáng)性。

3. 一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。

4. 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，做復(fù)孔。

5. 如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高，請(qǐng)先稀釋后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以稀釋倍數(shù)。

6. 在配制標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)溶液工作液時(shí)，請(qǐng)以相應(yīng)的稀釋液配制，不能混淆。

7. 底物請(qǐng)避光保存。

8. 不要用其它生產(chǎn)廠(chǎng)家的試劑替換試劑盒中的試劑。

四、ELISA試劑盒優(yōu)點(diǎn)：

我司共有14000余種ELISA試劑盒物種涵蓋Human,Mouse,Rat等，品種具備以下優(yōu)點(diǎn)：

*品質(zhì)—高品質(zhì)的抗體和試劑是ELISA試劑盒的基礎(chǔ)

精確特異—特異檢測(cè)目標(biāo)分子，結(jié)果精確可重復(fù)

高度靈敏—可檢測(cè)到pg/mL級(jí)別的目標(biāo)

種類(lèi)齊全—可覆蓋人、大鼠、小鼠、棉鼠、獼猴、豬、馬、犬和貓等多個(gè)種屬

優(yōu)化設(shè)計(jì)—可拆卸式96孔板(12X8)，為血清、血漿、尿樣和細(xì)胞培養(yǎng)物樣本檢測(cè)進(jìn)行優(yōu)化

五、人骨橋素(OPN)ELISA試劑盒結(jié)果計(jì)算：

在半對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙上繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為X軸，相應(yīng)的OD值為Y軸，用四參數(shù)或?qū)?shù)-對(duì)數(shù)法繪制zui合適的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。濃度與OD值成反比關(guān)系，隨著標(biāo)準(zhǔn)品濃度的增加，黃色強(qiáng)度就減少，即OD值減少樣本濃度可直接從標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)上讀取。如果樣本實(shí)驗(yàn)前進(jìn)行了稀釋?zhuān)瑒t試劑盒zui后結(jié)果應(yīng)乘以相應(yīng)的稀釋因子標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)為逆向S型曲線(xiàn)。

附：采用全自動(dòng)酶標(biāo)儀檢測(cè)，只需檢測(cè)前設(shè)置好酶標(biāo)儀的相關(guān)參數(shù)，如坐標(biāo)參數(shù)（線(xiàn)性，半對(duì)數(shù)）和計(jì)算方式參數(shù)（三次回歸、四參數(shù)或雙對(duì)數(shù)曲線(xiàn)方程），即可直接得到結(jié)果。

產(chǎn)品名稱(chēng)存放：收到貨后貯存于4℃，強(qiáng)烈建議盡快使用配制的試劑1X緩沖液貯存于4℃，將不用的微孔板放回至密封袋內(nèi)密封起來(lái)，貯存于4℃，已稀釋的標(biāo)準(zhǔn)品，生物標(biāo)記物，抗體和HRP貯存于4℃。

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