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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱:

血清淀粉樣蛋白A試劑盒 ,人血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒

產(chǎn)品型號:SAA

廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家

所在地:上海市

更新時間:2016-02-23

產(chǎn)品簡介:

人血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒溫育,用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。

產(chǎn)品特性Product characteristics
品牌R&D/美國

一、人血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒的實驗原理

ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標(biāo)本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。

產(chǎn)品名稱:人血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒 

產(chǎn)品規(guī)格:96T 48T

產(chǎn)品品牌:滬鼎生物 TSZ

樣品類型  血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清等樣品類型 

檢測方法  酶聯(lián)免疫法

特 異 性  公司ELISA試劑盒具有較高的靈敏度和出色的特異性 

交叉反應(yīng)  由于當(dāng)前的酶聯(lián)免疫科學(xué)技術(shù)和知識有限,現(xiàn)有技術(shù)不可能完成藥物檢測的靶抗原之間和所有其他物種的類似物。因此,交叉反應(yīng)可能仍然存在 

樣 本 量  50-100 μL 

實驗時間  1–4.5h 

儲存條件  2-8°C 

儲存方法  可以存儲在2 - 8°C長達(dá)1個月(專家建議:4°C恒溫保存,酶免試劑盒實驗效果更佳)。對于長期存儲,請在-20°C的存儲。盡量保持試驗板在密封鋁箔袋,避免潮濕 

有 效 期  6 months 

使用優(yōu)點  ELISA試劑盒可特異性定量測定疾病相關(guān)蛋白,包括細(xì)胞因子、趨化因子、β淀粉樣蛋白與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)靶標(biāo)。

■靈敏,準(zhǔn)確和*的性能

■用血清、血漿、組織培養(yǎng)上清或裂解產(chǎn)物進(jìn)行過驗證

■在半天內(nèi)可完成的現(xiàn)成,方便的檢測

二、人血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒樣品收集、處理及保存方法

1.血清:操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2.血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。

3.細(xì)胞上清液:1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4.組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液

5.保存:如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

三、人血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒操作步驟

1)取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置30分鐘。

2)分組:取出96孔板,根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品組(6個濃度)、空白孔、待測樣品組。

3)標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:準(zhǔn)備小試管6 只,依次編好號碼,先在各小試管中加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液100ul,然后取原濃度標(biāo)準(zhǔn)品100ul加入一只已編好號的試管中,充分混勻;再在該試管中取100ul 加入第二支試管中,充分混勻;再在該試管中取100ul加入第三只試管中,充分混勻;再在該試管中取100ul 加入第四只試管中,充分混勻;再在該試管中取100ul加入第五只試管中,充分混勻;然后在該試管中取100ul,棄掉。第六只試管作為0 號標(biāo)準(zhǔn)品。

注:為減少實驗誤差,保證準(zhǔn)確性,建議設(shè)置復(fù)孔。

4)加樣:依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入50ul的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中;空白對照孔加入50ul的蒸餾水;其余微孔中先加樣品40ul然后再加生物素標(biāo)記的抗體10ul。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

5)溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。

6)洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30 秒棄去,如此重復(fù)5 次,拍干。

7)加酶標(biāo)溶液:標(biāo)準(zhǔn)品組、待測樣本組各孔中加入50ul的酶標(biāo)溶液(空白對照孔除外)。

8)溫育:酶標(biāo)板用封板紙密封后,放入濕盒內(nèi)于37℃恒溫孵育1小時。

9)洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,靜置15-30s,充分清洗酶標(biāo)板5次,用吸水紙*拍干。

10)顯色:各孔加入顯色劑A液50ul后,再加入顯色劑B液50ul。

11)終止:25-37℃下避光反應(yīng)10-15分鐘,加入50ul終止液。

12)讀板:在450nm波長讀取各孔的OD值。

注:讀板時必須拭干板底殘留的液體和手指痕跡,讀板時間控制在終止反應(yīng)后的30分鐘內(nèi),以免影響準(zhǔn)確性。

四、“人血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒”保存:

1.所有試劑均按試劑瓶標(biāo)簽上所示保存。請注意,收到試劑盒后請盡快將標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液A、檢測溶液B以及96孔板保存于-20℃。

2.使用后的試劑盒:剩余試劑仍需按照試劑瓶標(biāo)簽所示的溫度保存,開封后的酶標(biāo)板要加干燥劑后密封保存于-20℃,避免潮濕。

3.試劑盒內(nèi)酶標(biāo)條可拆卸,按實驗需求可分多次使用。使用后的剩余試劑盒建議在*實驗后1個月內(nèi)使用完畢。產(chǎn)品過期時間以盒子上的標(biāo)簽為準(zhǔn),保質(zhì)期內(nèi)所有組分都確保是穩(wěn)定的。

五、注意事項

1.于2-8℃保存,有效期6個月。每次使用前應(yīng)先平衡至室溫。

2.中終止液具有腐蝕性,要小心使用。

3.未使用完的板條應(yīng)密封保存。

4.瓶蓋每次使用后要擰緊,各瓶蓋之間不可混用。不同批號試劑盒的試劑組份不可混用。

5.試驗樣本應(yīng)為無染菌、無血脂、無溶血的血清。任何樣本都應(yīng)視為傳染源妥善處理。

六、“人血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒”的質(zhì)量保證:
檢測用所有試劑全部都為進(jìn)口試劑,適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本,靈敏度*。我們專業(yè)的ELISA技術(shù)服務(wù),保證對所售任何產(chǎn)品一概負(fù)責(zé)到底,每一份實驗結(jié)果都真實可靠!
A. 嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
B. 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
C. 本試劑不同批號組分不得混用。
D. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。

七、保存條件及有效期

1.試劑盒保存:2-8℃

2.有效期:6個月

本公司對所有售出的產(chǎn)品保證質(zhì)量,并提供良好的售后服務(wù),有關(guān)產(chǎn)品質(zhì)量的投訴,請在收到貨物的32天內(nèi)以書面形式提出,并向我公司技術(shù)人員提供相應(yīng)的材料,我們會及時派人解決。所有形式的賠償或退換僅限于產(chǎn)品本身,不涉及其他間接內(nèi)容。凡購買本公司任意款elisa試劑盒,均可享受免費(fèi)代測服務(wù),并提供技術(shù)指導(dǎo)。

人血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒檢測中常見問題解析

近幾年來,RDElisa試劑盒已經(jīng),酶聯(lián)免疫試劑盒是較普遍常用的藥物殘留檢測方法,與儀器分析技術(shù)相比具有快速、簡便、準(zhǔn)確和靈敏度高等特點,但對實驗操作條件的要求比較嚴(yán)格。實驗條件主要由實驗室的操作環(huán)境和操作人員的操作熟練程度兩方面組成,但ELISA試劑盒對實驗室操作環(huán)境的要求是幾種藥物殘留檢測方法中相對較低的。由于大部分的試驗操作步驟都是由實驗人員來完成的,人為的誤差相對嚴(yán)重一些。因此,我司根據(jù)多年的經(jīng)驗,對RD品牌的Elisa試劑盒常見問題所解析,避免新手對它不了解而耽誤實驗,浪費(fèi)金錢。以下是一些常見問題,均以我司所供應(yīng)的品牌試劑盒為例歡迎閱讀參考!
問:加入稀釋劑是否會將樣本進(jìn)一步稀釋?
答:因為稀釋劑是加入到所有的孔中,標(biāo)準(zhǔn)和被測樣本都被同樣稀釋,所以樣本的濃度可從標(biāo)準(zhǔn)曲線讀出,而不需作稀釋調(diào)整。
問:我是否可將標(biāo)準(zhǔn)曲線的兩端延伸?
答:在任何情況下,我們都不支持超出確定范圍的實驗結(jié)果。在我們確定的測試范圍,我們保證實驗結(jié)果的可重復(fù)性。
問:為什么不將測試范圍延伸到所述的靈敏度?
答:靈敏度是統(tǒng)計中大于零的可測到的zui低值。它是通過本底信號和試驗的可變性計算出來的。靈敏度是將20個零復(fù)制物的中值加兩個標(biāo)準(zhǔn)差從標(biāo)準(zhǔn)曲線換算成分析物的濃度。而zui低標(biāo)準(zhǔn)是我們可以放心的、仍可與標(biāo)準(zhǔn)曲線成直線相關(guān)的zui低點,因而是可定量的。
    問:標(biāo)準(zhǔn)曲線為什么要采用4-pl擬合?
    答:滬鼎生物Systems在研發(fā)和質(zhì)控我們絕大多數(shù)的QuantikineELISA試劑盒時,采用4-相參數(shù)的曲線擬合(又名為4-pl或sigmoidal曲線擬合)。一般來說,它比log-log和直線有更好的曲線擬合。如果數(shù)據(jù)分析不可用4-pl的話,log-log是下一個的選擇。

 

用于稀釋高濃度的結(jié)合物以配成工作液。為避免結(jié)合物在反應(yīng)中直接吸附在固相載體上,在稀釋緩沖液中常加入高濃度的無關(guān)蛋白質(zhì)(例如 1%牛血清白蛋白),通過競爭以抑制結(jié)合物的吸附。一般還加入具有抑制蛋白質(zhì)吸附于塑料表面的非離子型表面活性劑,如吐溫20, 0.05%的濃度較為適宜。在間接測定抗體時,血清標(biāo)本需稀釋后進(jìn)行測定,也可應(yīng)用這種稀釋液。

 

 

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