服務(wù)熱線
18221656311
歡迎訪問上海滬鼎生物科技有限公司網(wǎng)站
產(chǎn)品型號:LAP
廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
所在地:上海市
更新時(shí)間:2016-04-12
產(chǎn)品簡介:
品牌 | R&D/美國 |
---|
【產(chǎn)品名稱】:人亮氨酰氨基肽酶(LAP)ELISA試劑盒
【產(chǎn)品用途】:被測樣品定性定量分析
【產(chǎn)品規(guī)格】:96T/48T(兩種規(guī)格)
【檢測方法】:酶免法/酶聯(lián)免疫法(ELISA)
【保存條件】:2-8℃
【供 貨 期】:1-3天(現(xiàn)貨供應(yīng))
【產(chǎn)品性狀】:液體盒裝
【產(chǎn)品價(jià)格】:電議(含稅含運(yùn)費(fèi),我們?nèi)烫峁〦LISA實(shí)驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)和ELISA試劑盒免費(fèi)代測)
【ELISA檢測試劑盒種屬】:鹿、羊、雞、鴨、狼、魚、馬、牛、人、大鼠、犬、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、馬鈴薯、兔子、豬、猴等動植物。
【銷售優(yōu)勢】:價(jià)格行業(yè)優(yōu)勢、質(zhì)量可靠、如果出現(xiàn)客觀質(zhì)量問題包換退
【待檢樣本】:體液、血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標(biāo)本等
樣品采集:收集標(biāo)本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對收集后當(dāng)天進(jìn)行檢測的標(biāo)本,儲存在4℃?zhèn)溆茫缬刑厥庠蛐枰芷谑占瘶?biāo)本,將標(biāo)本及時(shí)分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復(fù)凍融。標(biāo)本2-8℃可保存48小時(shí),-20℃可保存1個(gè)月。-70℃可保存6個(gè)月。部分激素類標(biāo)本需添加抑肽酶。
【產(chǎn)品保質(zhì)期】:半年(六個(gè)月)
一、實(shí)驗(yàn)原理:
結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體與受檢標(biāo)本(抗原或抗體)起反應(yīng)。用洗滌的方法洗去未結(jié)合的抗原或抗體。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。根據(jù)實(shí)際的應(yīng)用方法,可以分成以下幾種:
雙抗夾心 ELISA:將捕獲抗體包被在固相載體上,封閉后加入待檢抗原,溫育后加入酶標(biāo)檢測抗體,捕獲抗體和檢測抗體可以是針對不同表位的兩種單抗,也可以是針對同一抗原的一種單抗與一種多抗,但是檢測抗體需要經(jīng)過酶標(biāo)。
競爭ELISA:用待檢抗原或抗體去干擾已經(jīng)預(yù)先設(shè)計(jì)好的體系,zui終顯色的結(jié)果與待檢抗原或抗體的干擾程度成負(fù)相關(guān)。主要應(yīng)用于只有一個(gè)抗原表位的蛋白檢測。
多因子ELISA檢測技術(shù):多重ELISA芯片技術(shù)通過在96孔板的每個(gè)孔中以陣列的形式植入1~25種捕獲抗體,隨后像ELISA一樣操作,通過化學(xué)發(fā)光(HRP酶)和熒光燃料(紅外)來檢測。
受刺激的細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子是短暫的,并且不同細(xì)胞因子基因表達(dá)的動力學(xué)是變化的。通過ELISA實(shí)驗(yàn)只能檢測到的免疫反應(yīng)性的細(xì)胞因子蛋白的含量,而這并不能*代表細(xì)胞因子的生物活性的水平。例如,使用抗細(xì)胞因子抗體的一種ELISA不能區(qū)別如TGF-β1的細(xì)胞因子蛋白是無活性的前體形式還是有活性的成熟蛋白。此外,一種ELISA可以檢測部分降解的細(xì)胞因子蛋白,它們?nèi)杂忻庖叻磻?yīng)性(例如至少可識別兩個(gè)表位),當(dāng)時(shí)它可能卻喪失了它們的生物學(xué)活性。
二、實(shí)驗(yàn)過程:
三、人亮氨酰氨基肽酶(LAP)ELISA試劑盒操作要點(diǎn):
1.選擇合適的固相載體;
2.選擇合適的包被緩沖液;
3.確定*包被量;
4.加樣準(zhǔn)確,避免產(chǎn)生氣泡。
四、人亮氨酰氨基肽酶(LAP)ELISA試劑盒優(yōu)點(diǎn):
我司共有14000余種ELISA試劑盒物種涵蓋Human,Mouse,Rat等,品種具備以下優(yōu)點(diǎn):
*品質(zhì)—高品質(zhì)的抗體和試劑是ELISA試劑盒的基礎(chǔ)
精確特異—特異檢測目標(biāo)分子,結(jié)果精確可重復(fù)
高度靈敏—可檢測到pg/mL級別的目標(biāo)
種類齊全—可覆蓋人、大鼠、小鼠、棉鼠、獼猴、豬、馬、犬和貓等多個(gè)種屬
優(yōu)化設(shè)計(jì)—可拆卸式96孔板(12X8),為血清、血漿、尿樣和細(xì)胞培養(yǎng)物樣本檢測進(jìn)行優(yōu)化
五、常見問題解答
小編簡單整理了5個(gè)問題,具體內(nèi)容如下:
1、一個(gè)ELISA試劑盒檢測幾個(gè)樣品?
小編自己在各大論壇看到zui多的三個(gè)答案:
1)48T 可做37個(gè)樣本加11個(gè)標(biāo)準(zhǔn)曲線;96T 可做85個(gè)樣本加11個(gè)標(biāo)準(zhǔn)曲線
2)以96T試劑盒來算,定量的試劑盒一般可以做85個(gè)左右的樣品,定性的試劑盒可以做85個(gè)左右的樣品
3)96T的ELISA試劑盒,去除標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)孔檢測,zui多還能檢測85個(gè)標(biāo)本;48T的zui多37個(gè)樣本。
2、elisa試劑盒96T的能做檢測多少血清樣品?板能重復(fù)利用嗎?
96T,一般做復(fù)孔的話,做標(biāo)準(zhǔn)曲線需要11個(gè)孔,剩下85個(gè)孔就可以做85個(gè)樣本。這個(gè)板不能重復(fù)利用。而且配套的試劑也只是夠一塊板子用的。
3、想請教一下,我想用elisa法測血清里的一種抗原,查了資料,發(fā)現(xiàn)沒有現(xiàn)成的試劑盒用,現(xiàn)在就有2種備選方案,一種是買抗體對自己包被(查了滬鼎生物等大公司都沒有可用于elisa的單抗)。哪種比較好呢?自己包被的會不會比國產(chǎn)的試劑盒可靠呢?
如果你覺得技術(shù)不錯有隊(duì)其他公司不放心,可以自己購買抗體對自己包被,這個(gè)就是麻煩點(diǎn),自己包被用著放心,舒心;
另外國內(nèi)還是有一些資質(zhì)不錯的公司,如上海滬鼎,上海滬鼎,上海滬鼎等等
4、western 和ELISA 處理樣本有何差別?
Western Blot 樣品制備要加蛋白裂解液(含有蛋白酶抑制劑),然后冰上研磨,收集于EP管,冰上裂解30min,4度12000rpm離心15min,取上清分裝,即得到蛋白樣品。建議直接電泳,多余的-80保存。建議分裝的蛋白每支略多于一次上樣量,一次性用完一支,避免反復(fù)凍融。
ELISA樣品,直接腦組織冰上勻漿,收集于EP管,同上一樣離心,大約220-250ul每支分裝(因?yàn)镋LISA上樣量基本都是每孔100ul,做復(fù)孔,每個(gè)樣品2孔,就需要200ul,為了避免不夠2孔,分裝時(shí)要大于200ul每支),直接實(shí)驗(yàn)。多余的-80保存,一樣避免反復(fù)凍融。
不過ELISA少量樣品進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn),或者查閱文獻(xiàn),看看大概組織里有多高濃度,選擇合適的試劑盒,測量范圍要與組織濃度相符。避免濃度過高測量不準(zhǔn),或者濃度過低,小于試劑盒zui低可測濃度。
5、Elisa試劑盒該買哪家公司的呢?
提出這個(gè)問題的朋友其實(shí)該打,目前上各個(gè)品牌的試劑盒生廠商,都會有其偏重點(diǎn),像滬鼎生物在細(xì)胞因子方面的試劑盒就非常牛逼,而其他牌子也一樣的。
Bender:粘附分子方面的試劑盒;
Cayman:花生四烯酸類產(chǎn)品的試劑盒;
Merck(Linco):內(nèi)分泌研究方面的試劑盒;
Tips:
1、買Elisa試劑盒時(shí),盡量先查文獻(xiàn),通過文獻(xiàn)找品牌,再找供應(yīng)商,找供應(yīng)商就找正規(guī)代理商,千萬不要去干“賠夫人又折兵”的蠢事。
2、ELISA中,復(fù)孔就是同一個(gè)樣品加到至少兩個(gè)孔中(一般3個(gè)或4個(gè)),zui后取其平均值作為樣品的讀數(shù),這樣測得的結(jié)果才有說服力!
做復(fù)孔是為了較好的較少組內(nèi)差異,如果血清不足不做復(fù)孔也可以。