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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱:

ELISA試劑盒,豬細胞間粘附分子2ELISA試劑盒

產(chǎn)品型號:ICAM-2/CD102

廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家

所在地:上海市

更新時間:2016-06-03

產(chǎn)品簡介:

“豬細胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA試劑盒"具有快速、敏感、簡便、易于標準化等優(yōu)點,本司供應(yīng)試劑盒種屬有人(Human)、大鼠(Rat)、小鼠(Mouse)、兔(Rabbit)、豬(Pig)、猴(Monkey)等;中英文雙版說明書。

產(chǎn)品特性Product characteristics
品牌R&D/美國

一、性能參數(shù)

    使用前*閱讀說明書。本酶聯(lián)免疫試劑盒是基于經(jīng)典酶聯(lián)夾心技術(shù)原理,只能用于研究用途,不得用于醫(yī)學(xué)診斷。

二、“豬細胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA試劑盒”工作原理  

   所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒(ELISA)。預(yù)先包被的抗體為多克隆抗體。檢測相抗體也為多克隆抗體,經(jīng)生物素(biotin)標記。樣品和生物素標記抗體先后加入酶標板孔反應(yīng)后,PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標記的親和素反應(yīng);經(jīng)過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關(guān)。

三、每套試劑盒中內(nèi)容(96T)

材料 數(shù)量

標準品 96T(2vial)

預(yù)包被抗體的96孔板 96T(8×12)

生物素標記人ANG抗體 96T (1:100)

ABC(親和素-過氧化物酶復(fù)合物) 96T (1:100)

樣品稀釋液 96T×2

抗體稀釋液 96T×1

ABC稀釋液 96T×1

TMB顯色液A 96T×1

TMB顯色液B 96T×1

TMB終止液 96T×1

ELISA洗滌液 96T×1(1:25)

四、需要而未提供的試劑和器材

1. 37℃恒溫箱。

2. 標準規(guī)格酶標儀。

3. 自動洗板機。

4. 單通道或多通道可調(diào)節(jié)移液器以及其吸頭。

5. 蒸餾水,容量瓶等

6. 干凈的試管和Eppendof管。

五、“豬細胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA試劑盒”注意事項

1. 從-20℃取出的試劑盒,在4℃解凍guoye。盒內(nèi)每一瓶解凍的溶液在開啟瓶蓋之前都要輕輕搖勻,避免解凍時出現(xiàn)的分層,否則會出現(xiàn)濃度不均一的現(xiàn)象。

2. 開啟試劑盒之前要室溫平衡至少30分鐘。

3. 配制各種試劑時,切記混勻!

4. 用戶在初次使用試劑盒時,應(yīng)將各種試劑管離心數(shù)分鐘,以便試劑集中到管底。

5. 建議所有標準品、樣本都做雙份檢測。

6. 要嚴格避免操作過程中酶標板干燥。干燥會使酶標板上生物成份迅速失活!

7. 為免交叉污染,要避免重復(fù)使用手中的吸頭和試管。

六、洗板方法

    手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內(nèi)的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標板朝下用力拍幾次;將推薦的PBS或TBS洗滌緩沖液至少0.35ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘。根據(jù)需要,重復(fù)此過程數(shù)次。

自動洗板:如果有自動洗板機,應(yīng)在熟練使用后再用到正式實驗過程中。

七、樣品的準備和保存

    樣品如果不立即分析,應(yīng)分裝后冷凍保存,且避免反復(fù)凍融。

血清——用干凈試管收集血液,室溫凝固2小時或4℃guoye,離心1000×g 10分鐘,收集血清。立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。

細胞培養(yǎng)、組織勻漿、體液——離心去除沉淀,立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。

八、樣品稀釋的一般原則

    用戶須查閱文獻了解標本內(nèi)待測因子的含量,決定適當(dāng)?shù)南♂尡稊?shù),以使稀釋后樣品中待測因子的濃度處于ELISA試劑盒的*檢測范圍。樣品的稀釋應(yīng)有詳細記錄。

九、標本的采集及保存

1. 血清:全血標本請于室溫放置2小時或4℃guo夜后于1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

2. 血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3. 細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本:請1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
4. 樣本處理:血清或血漿標本推薦稀釋10,000倍。
注:以上標本置4℃保存應(yīng)小于1周,-20℃或-80℃均應(yīng)密封保存,-20℃不應(yīng)超過1個月,-80℃不應(yīng)超過2個月;標本溶血會影響zui后檢測結(jié)果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。

十、操作程序

1. 確定本次檢測所需的已包被抗體的酶標板孔數(shù)目。

2. 將倍比稀釋的標準品各0.1ml依次加入一排7孔中,1孔只加樣品稀釋液的作為對照。處理后的標本按100ul每孔加入。

3. 酶標板加上蓋,37℃反應(yīng)90分鐘。

4. 反應(yīng)后用自動洗板機吸去酶標板內(nèi)的液體;或甩去酶標板內(nèi)液體,再對著吸水紙拍幾下。洗滌2次。

5. 將準備好的生物素抗體工作液按每孔0.1ml依次加入。37℃反應(yīng)60分鐘。

6. 0.01M TBS或0.01M PBS洗滌3次,每次浸泡1分鐘左右。

7. 將準備好的ABC工作液按每孔0.1ml依次加入。37℃反應(yīng)30分鐘。

8. 0.01M TBS或0.01M PBS洗滌5次,每次浸泡1-2分鐘左右。

9. 按每孔0.1ml依次加入TMB顯色工作液,37℃避光反應(yīng),反應(yīng)過程中,要經(jīng)常的觀察,當(dāng)肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色,后3-4孔差別不明顯時,即可加入TMB終止液0.1ml/孔。(顯色反應(yīng)zui長不要超過30分鐘)。

10. 用酶標儀在450nm測定O.D.值。

11. 根據(jù)樣品的吸光值在坐標上找出對應(yīng)的濃度。用戶也可以使用各種應(yīng)用軟件來計算。應(yīng)記住由于樣品稀釋了N倍,其實際濃度應(yīng)該×N。

十一、“豬細胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA試劑盒”計算標本待測因子含量

【特異性】: 系統(tǒng)和其它細胞因子無交叉反應(yīng)。

【保存】: -20℃ [短期內(nèi)(如兩周)可4℃

【有效期】: 12個月(-777℃)。

【用途】: 用給我留言于體外定量分析液體標本(通用型)

本試劑盒經(jīng)過充分驗證,保證有效且重復(fù)性佳。歡迎我司業(yè)務(wù)員查詢價格及優(yōu)惠信息。

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