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產品型號:
廠商性質:生產廠家
所在地:上海市
更新時間:2017-12-26
產品簡介:
品牌 | BIM | 供貨周期 | 現貨 |
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豬胰島素原(PI)ELISA試劑盒技術指導
l 本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細胞上清及相關液體樣本中豬胰島素原(PI)的含量。
l 有效期:6個月
l 保存條件:2-8℃
l 本試劑盒僅供體外研究使用,不用于臨床診斷
實驗原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被豬胰島素原(PI)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的豬胰島素原(PI)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。
豬胰島素原(PI)ELISA試劑盒技術指導主要優(yōu)點
1.高效、靈敏、特異的抗體;
2. 穩(wěn)定的重復性和可靠性;
3. 吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
4. 適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型;
5. zui大限度的節(jié)省實驗經費。
常用的使用方法
一、雙抗體夾心法測定抗原
將抗原免疫*種動物獲得的抗體吸附于固相表面;
加抗原,形成抗原-抗體復合物;
加抗原免疫第二種動物獲得的抗體,形成抗體抗原抗體復合物;
加酶標抗抗體(第二種動物抗體的抗體);
加底物。底物的降解量=抗原量。
二、直接法測定抗原
將抗原吸附在載體表面;
加酶標抗體,形成抗原—抗體復合物;
加底物。底物的降解量=抗原量。
三、間接法測定抗體
將抗原吸附于固相載體表面;
加抗體, 形成抗原-抗體復合物;
加酶標抗體;
加底物。 測定底物的降解量=抗體量。
問題解答
靈敏度是什么意思?
根據我司多年來的銷售經驗,我司了解到客戶針對購買Elisa試劑盒時,靈敏度要求非常高。這是為什么呢?為您解析Elisa試劑盒靈敏度。Elisa試劑盒靈敏度高能使產品達到一定的數值,對產品試驗有著非常大利益,它能檢測到的分析物的zui小量,表示檢測下限的能力。
相對靈敏度=真陽性/(真陽性+假陰性)×100%
測定方法及表示方法:靈敏度標準品、質控血清、陽性標本稀釋終點、血清盤(pannel)及臨床標本陽性率。
靈敏度標準品可以從衛(wèi)生部臨檢中心購買,質控血清可以從衛(wèi)生部臨檢中心購買,也可以自己配制。因為質控血清不一定是原倍血清,或由于片段、亞型、位點等原因,評定試劑盒的靈敏度都帶有一定的片面性。
陽性標本稀釋終點的方法常用于不同試劑盒的比較,但也有上述的片面性。陽性pannel有些可以從衛(wèi)生部臨檢中心購買,如HBsAg陽性pannel,也可以自己配制。臨床標本陽性率,是一種粗略的估計,但對臨床很實用。
注意事項
1. 由于產品底物顯色劑對光及其敏感,因此要避光保存。
2. 檢測吸光度前應將酶標儀打開,將其預熱30min以上。
3. 孵育的時間應該嚴格按照試劑盒說明書上的時間為準。
4. 要盡量做雙孔實驗,這樣才既能保證數據的準確性,又能反映出試劑盒的精密度。
5. 對樣本的結果有疑問時需要使用其他檢測方法進行驗證。
結果計算:
在半對數坐標紙上繪制標準曲線。標準品的濃度為X軸,相應的OD值為Y軸,用四參數或對數-對數法繪制zui合適的標準曲線。濃度與OD值成反比關系,隨著標準品濃度的增加,黃色強度就減少,即OD值減少樣本濃度可直接從標準曲線上讀取。如果樣本實驗前進行了稀釋,則試劑盒zui后結果應乘以相應的稀釋因子標準曲線為逆向S型曲線。
附:采用全自動酶標儀檢測,只需檢測前設置好酶標儀的相關參數,如坐標參數(線性,半對數)和計算方式參數(三次回歸、四參數或雙對數曲線方程),即可直接得到結果。
產品名稱存放:收到貨后貯存于4℃,強烈建議盡快使用配制的試劑1X緩沖液貯存于4℃,將不用的微孔板放回至密封袋內密封起來,貯存于4℃,已稀釋的標準品,生物標記物,抗體和HRP貯存于4℃。